24小时热门版块排行榜    

查看: 706  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

qibingli

金虫 (小有名气)

[交流] 原核表达

本人正在做IBDV VP2基因的原核表达,重组阳性质粒经酶切、PCR鉴定都正确,可就是不表达,请各为好心的虫友帮忙分析一下原因。
回复此楼

» 猜你喜欢

天行健,君子以自强不息!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiantianup007

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by skkyy88888 at 2008-10-18 16:56:
要先分析下基因是否合适原核表达.

怎么分析?
6楼2008-10-18 17:58:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

xiaoyao10022001

银虫 (初入文坛)

说的太粗略了,没有办法分析的,应当尽量具体说明如用什么菌种,用什么载体,在什么条件下表达;有具体的条件下才好分析。
2楼2008-10-18 12:58:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

一 做个IPTG诱导的浓度梯度
二 做个温度的梯度
三 最后还不行就做个不同菌株的
四 要不就换不同的培养液试试
3楼2008-10-18 16:26:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smallcat227

木虫 (著名写手)

1.诱导时要保证菌体不能太老,此时取点菌液,分别涂在不含抗生素和含抗生素的平板上,看看这时质粒丢失情况,如果此时质粒丢失很严重,可能会导致目标蛋白表达很少。此时应该是楼主的目标蛋白毒性很大导致质粒不稳定,这时可以选择本地表达底的菌株作为宿主菌;
2.看看你的目的蛋白的基因序列是否含有大肠杆菌的稀有密码子,特别是在N段开始表达的部分;
4楼2008-10-18 16:37:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 基金啊基金 +3 longfie172 2026-08-20 3/150 2026-08-21 00:04 by wuchongjun
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 让我中一个面上吧! +8 大萍1987 2026-08-20 10/500 2026-08-20 21:48 by 大萍1987
[基金申请] 言之凿凿,明天官网会通知放榜? +15 医学老男孩 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:35 by CaoLG
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见