24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 640  |  回复: 6
当前主题已经存档。

qibingli

金虫 (小有名气)

[交流] 原核表达

本人正在做IBDV VP2基因的原核表达,重组阳性质粒经酶切、PCR鉴定都正确,可就是不表达,请各为好心的虫友帮忙分析一下原因。
回复此楼
天行健,君子以自强不息!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoyao10022001

银虫 (初入文坛)

说的太粗略了,没有办法分析的,应当尽量具体说明如用什么菌种,用什么载体,在什么条件下表达;有具体的条件下才好分析。
2楼2008-10-18 12:58:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

一 做个IPTG诱导的浓度梯度
二 做个温度的梯度
三 最后还不行就做个不同菌株的
四 要不就换不同的培养液试试
3楼2008-10-18 16:26:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smallcat227

木虫 (著名写手)

1.诱导时要保证菌体不能太老,此时取点菌液,分别涂在不含抗生素和含抗生素的平板上,看看这时质粒丢失情况,如果此时质粒丢失很严重,可能会导致目标蛋白表达很少。此时应该是楼主的目标蛋白毒性很大导致质粒不稳定,这时可以选择本地表达底的菌株作为宿主菌;
2.看看你的目的蛋白的基因序列是否含有大肠杆菌的稀有密码子,特别是在N段开始表达的部分;
4楼2008-10-18 16:37:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skkyy88888

铜虫 (著名写手)

要先分析下基因是否合适原核表达.
5楼2008-10-18 16:56:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiantianup007

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by skkyy88888 at 2008-10-18 16:56:
要先分析下基因是否合适原核表达.

怎么分析?
6楼2008-10-18 17:58:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiantianup007

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by qibingli at 2008-10-18 11:53:
本人正在做IBDV VP2基因的原核表达,重组阳性质粒经酶切、PCR鉴定都正确,可就是不表达,请各为好心的虫友帮忙分析一下原因。

测序没有?
7楼2008-10-18 18:55:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qibingli 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿郑大085600,310分求调剂 +4 李潇可 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:12 by hypershenger
[考研] 求调剂 +6 白QF 2026-03-21 6/300 2026-03-26 20:37 by fmesaito
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿 西北大学 总分282 英语一62 求调剂 +7 18419759900 2026-03-25 7/350 2026-03-26 16:07 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 材料求调剂 +4 .m.. 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:30 by peike
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
信息提示
请填处理意见