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基因克隆 已有1人参与
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新人。我们通过全基因测序获得了基因的序列信息。 （1）本人是打算做某个基因在果实发育不同阶段的表达情况，按理说是只需要根据cds的序列设计引物，在RNA反转录后做定量表达分析就可以了。问：我在做qPCR的时候需不需要对设计引物所扩增的那段序列也测序，来检验下是不是目的片段呢？ （2）我觉得应该把基因全长的信息也再确定下，这时候是不是需要对测序得到的序列信息进行验证呢？即要克隆全长吗？怎么克隆全长啊？用race，还是在基因的两端进行设计引物，然后送pcr产物到公司测序就可以？但是这样怎么能保证p出来基因是全长呢？ 这方面完全不懂啊，大家给点帮助。 |
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