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msz147258

铁虫 (初入文坛)

[求助] 在线等,关于SDS-PAGE蛋白电泳的,求大神告诉我这是什么?已有1人参与

求大神告知蛋白条带最底下的那条蓝带是蛋白还是染料?

在线等,关于SDS-PAGE蛋白电泳的,求大神告诉我这是什么?
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在线等,关于SDS-PAGE蛋白电泳的,求大神告诉我这是什么?-1
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
msz147258: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-19 11:15:45
这个现象我们也经常出现,不影响实验结果观察的,原因可能是,蛋白电泳的最下面电极丝,可能正好在你蛋白胶的那条线位置,所以条带和染料跑到电极丝那个位置就不往下跑了,导致都堆积在那个位置,你的marker并不是没跑完,而是最小的条带已经跑出去了,堆积在那条线那里,如果你继续跑的话,你会发现你的marker条带会更少的

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
6楼2016-03-19 11:09:24
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沉默、颜泪

木虫 (正式写手)

上样Buffer是可以脱去的,如果你的那个脱不掉,表明是蛋白。可以考虑增大胶浓度将其分开。

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17楼2016-03-19 14:26:55
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msz147258

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-19 11:09:24
这个现象我们也经常出现,不影响实验结果观察的,原因可能是,蛋白电泳的最下面电极丝,可能正好在你蛋白胶的那条线位置,所以条带和染料跑到电极丝那个位置就不往下跑了,导致都堆积在那个位置,你的marker并不是没 ...

多谢了!求教导,如果想要marker条带都显示出来 应该怎么样改进我的实验方法?
9楼2016-03-19 11:21:21
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by msz147258 at 2016-03-19 11:21:21
多谢了!求教导,如果想要marker条带都显示出来 应该怎么样改进我的实验方法?...

这种情况也是偶尔出现,有时候觉得是配胶后最下面胶浓度会有点差异?所以我们就是按之前大概的时间来跑的,也会出现marker跑出去,但是只要目的条带不跑出去就好,麻烦就是不能参考之前看蓝色条带跑出去了

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
10楼2016-03-19 11:25:28
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by msz147258 at 2016-03-19 10:14:14
可是我的标准蛋白是六条带的,这里只有五条,是不是没跑完?

那个是buffer,只显示5条带,那就看你最小的蛋白多大,

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12楼2016-03-19 11:44:25
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by msz147258 at 2016-03-19 11:48:42
最小的蛋白分子量是:14400,最大的是:97400。用的是12%的分离胶。...

最小的marker如果是10kd,目的蛋白那就不会看不出来,蓝色部分跑到最底端,看看

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14楼2016-03-19 13:56:42
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MarchZR

银虫 (小有名气)

你就不能先脱色在看啊,最下面的明显是染料,溴酚蓝加多了,跑到最后没跑完
15楼2016-03-19 14:00:37
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MarchZR

银虫 (小有名气)

除了最后的那条带(跑胶经常有的属于正常),你其他一点带都没有,每条带都模糊,不知道你是怎么跑的,,,SDS-PAGE不难啊!哎,多学学基础的吧原理之类的~你这明显是样品有问题,好歹marker显出来了啊。。。。
16楼2016-03-19 14:05:14
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普通回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)

2楼2016-03-19 09:55:36
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msz147258

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 杨仔儿 at 2016-03-19 09:55:36
都有,没事

可否解释清楚一些
3楼2016-03-19 10:12:52
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msz147258

铁虫 (初入文坛)

可是我的标准蛋白是六条带的,这里只有五条,是不是没跑完?
4楼2016-03-19 10:14:14
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小小细胞啊

新虫 (小有名气)

染料染了胶以后脱色应该是会脱掉的吧

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5楼2016-03-19 10:42:32
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msz147258

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-19 11:09:24
这个现象我们也经常出现,不影响实验结果观察的,原因可能是,蛋白电泳的最下面电极丝,可能正好在你蛋白胶的那条线位置,所以条带和染料跑到电极丝那个位置就不往下跑了,导致都堆积在那个位置,你的marker并不是没 ...

可是那条蓝带还没有跑到胶的尽头呢?
7楼2016-03-19 11:15:25
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by msz147258 at 2016-03-19 11:15:25
可是那条蓝带还没有跑到胶的尽头呢?...

额,我意思就是条带不会继续往下走了,就停在那里了,你上面所以的条带都会到那里停下来,不会跑出去了,那条蓝色带就是好多条带堆积着呢

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
8楼2016-03-19 11:19:59
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