24小时热门版块排行榜    

查看: 2248  |  回复: 32
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

[求助] 摇瓶发酵大肠杆菌基因工程菌表达蛋白 已有2人参与

摇瓶LB发酵大肠杆菌基因工程菌表达蛋白,IPTG诱导几个小时后发酵液变澄清,什么原因,噬菌体吗,测pH和正常时无差别,无其他现象,有遇到过这种问题的吗,如何解决,请各位大神指教
回复此楼
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)

引用回帖:
23楼: Originally posted by DNA药物 at 2016-03-25 10:09:05
Iptg浓度不合适对菌生长其实是有抑制作用的

抑制是指生长缓慢或不生长,他的菌已经长混了,又变清,很有可能是噬菌体。楼主可以对着光亮看一下培养基里是不是有小颗粒,那些是死菌尸体相互缠在一起了。

发自小木虫IOS客户端
A right way maybe not a good way!
27楼2016-03-25 10:53:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)

引用回帖:
26楼: Originally posted by hanwei1150 at 2016-03-25 10:41:48
没有发现培养基中有明显絮状片段,我下周再试试无菌水配置抗生素,但我之前都是用0.22微米过滤后再用的...

0.22的滤膜是不能过滤噬菌体的。

发自小木虫IOS客户端
A right way maybe not a good way!
28楼2016-03-25 10:55:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)

引用回帖:
25楼: Originally posted by hanwei1150 at 2016-03-25 10:39:13
应该不是噬菌体污染吧,我们打算重新买一批感受态试试,谢谢您帮忙分析原因...

90%是噬菌体,别我为什么这么肯定,那都是泪!!!

发自小木虫IOS客户端
A right way maybe not a good way!
29楼2016-03-25 10:56:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)

引用回帖:
30楼: Originally posted by hanwei1150 at 2016-03-25 10:59:26
我平行做表达其他蛋白的菌种是没有问题的,如何解释,而且是同时做...

你的这个克隆被污染了,不信你可以交叉加一点再培养试试

发自小木虫IOS客户端
A right way maybe not a good way!
32楼2016-03-26 07:55:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)

引用回帖:
31楼: Originally posted by hanwei1150 at 2016-03-25 10:59:57
如果是噬菌体,请问如何解决...

从克隆到抗生素都换了吧!做发酵最怕的就是噬菌体,比较难防!

发自小木虫IOS客户端
A right way maybe not a good way!
33楼2016-03-26 07:58:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hanwei1150 的主题更新
信息提示
请填处理意见