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铺在六孔板里的细胞总是莫名死亡破碎,求指点!!!!已有1人参与
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刚做细胞实验的小白,这几天铺六孔板总是发生细胞死亡破碎飘在培养基上的情况。下面贴壁生长的细胞状态一般,而且是加药不加药都出现了这样的现象。 (1)刚开始加药的浓度较大,加药组比对照组细胞破碎的现象多,后来浓度降低了十倍,还是所有组别都出现了细胞破碎的现象,并且加药和不加药破碎的都差不多了,个人觉得可以排除药物浓度的问题。 (2)加药之前进行了同步化,时间约为22-24h,同步化结束更换培养基之前观察,细胞状态良好,无破碎现象。换液后12h观察就出现了细胞破碎现象。且同批未同步化放在培养瓶里培养的细胞换液后状态良好,无破碎现象。会不会与同步化时间过长产生一定的应激反应有关? (3)铺六孔板密度不是特别均匀,中间密度高,周围稀,会不会是因为中间密度高,长满了而导致的细胞破碎? (4)药物本身可能有一定的促凋亡作用,但是不给药组也出现这样的现象不能理解? 求各位大神指点!!!! |
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