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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 铺在六孔板里的细胞总是莫名死亡破碎，求指点！！！！
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靜靜の零?y

铁虫 (初入文坛)

[求助] 铺在六孔板里的细胞总是莫名死亡破碎，求指点！！！！ 已有1人参与

刚做细胞实验的小白，这几天铺六孔板总是发生细胞死亡破碎飘在培养基上的情况。下面贴壁生长的细胞状态一般，而且是加药不加药都出现了这样的现象。
（1）刚开始加药的浓度较大，加药组比对照组细胞破碎的现象多，后来浓度降低了十倍，还是所有组别都出现了细胞破碎的现象，并且加药和不加药破碎的都差不多了，个人觉得可以排除药物浓度的问题。
（2）加药之前进行了同步化，时间约为22-24h，同步化结束更换培养基之前观察，细胞状态良好，无破碎现象。换液后12h观察就出现了细胞破碎现象。且同批未同步化放在培养瓶里培养的细胞换液后状态良好，无破碎现象。会不会与同步化时间过长产生一定的应激反应有关？
（3）铺六孔板密度不是特别均匀，中间密度高，周围稀，会不会是因为中间密度高，长满了而导致的细胞破碎？
（4）药物本身可能有一定的促凋亡作用，但是不给药组也出现这样的现象不能理解？
求各位大神指点！！！！
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1楼 2016-03-16 09:37:14
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Galina0309

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 靜靜の零?y at 2016-03-16 22:52:04
什么叫先加细胞再加培养基？...

就是操作前，先把平板拿紫外照着，然后再加入细胞悬液，再加入培养基就好啦～

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5楼2016-03-17 13:42:07
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Galina0309

新虫 (初入文坛)
我铺六孔板是周边长得比较密～你先加细胞，再加培养基会好一点

发自小木虫IOS客户端
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2楼2016-03-16 13:27:32
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四夕流年

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
靜靜の零?y: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-03-16 22:50:22
1、铺板前PBS浸润6孔板，制成细胞悬浮液，然后加入平铺就好  试试
2、6孔板换液时注意细胞外露  减少液体没有时  细胞暴露时间  细胞会干了的   操作台风大啊  肯定挂掉类
3、正常情况细胞状态差也会有些漂浮  其实不影响实验
4、调整细胞状态铺板   饱满 正常  健康
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3楼2016-03-16 15:53:37
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靜靜の零?y

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Galina0309 at 2016-03-16 13:27:32
我铺六孔板是周边长得比较密～你先加细胞，再加培养基会好一点

什么叫先加细胞再加培养基？
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4楼2016-03-16 22:52:04
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