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靜靜の零?y

铁虫 (初入文坛)

[求助] 铺在六孔板里的细胞总是莫名死亡破碎,求指点!!!! 已有1人参与

刚做细胞实验的小白,这几天铺六孔板总是发生细胞死亡破碎飘在培养基上的情况。下面贴壁生长的细胞状态一般,而且是加药不加药都出现了这样的现象。
(1)刚开始加药的浓度较大,加药组比对照组细胞破碎的现象多,后来浓度降低了十倍,还是所有组别都出现了细胞破碎的现象,并且加药和不加药破碎的都差不多了,个人觉得可以排除药物浓度的问题。
(2)加药之前进行了同步化,时间约为22-24h,同步化结束更换培养基之前观察,细胞状态良好,无破碎现象。换液后12h观察就出现了细胞破碎现象。且同批未同步化放在培养瓶里培养的细胞换液后状态良好,无破碎现象。会不会与同步化时间过长产生一定的应激反应有关?
(3)铺六孔板密度不是特别均匀,中间密度高,周围稀,会不会是因为中间密度高,长满了而导致的细胞破碎?
(4)药物本身可能有一定的促凋亡作用,但是不给药组也出现这样的现象不能理解?
求各位大神指点!!!!
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匿名

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本帖仅楼主可见
6楼2018-03-29 20:51:39
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Galina0309

新虫 (初入文坛)

我铺六孔板是周边长得比较密~你先加细胞,再加培养基会好一点

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-03-16 13:27:32
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四夕流年

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
靜靜の零?y: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-03-16 22:50:22
1、铺板前PBS浸润6孔板,制成细胞悬浮液,然后加入平铺就好  试试
2、6孔板换液时注意细胞外露  减少液体没有时  细胞暴露时间  细胞会干了的   操作台风大啊  肯定挂掉类
3、正常情况细胞状态差也会有些漂浮  其实不影响实验
4、调整细胞状态铺板   饱满 正常  健康
3楼2016-03-16 15:53:37
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靜靜の零?y

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Galina0309 at 2016-03-16 13:27:32
我铺六孔板是周边长得比较密~你先加细胞,再加培养基会好一点

什么叫先加细胞再加培养基?
4楼2016-03-16 22:52:04
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