应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒双酶切
111/2返回列表12下一页
查看: 1785  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

amberhwk

新虫 (小有名气)

[交流] 质粒双酶切

Pcold 载体提质粒后用Ecok I 和Xba I进行双酶切，应该切下两条带，哪一个是应该回收的呢，我做的时候总切不下来，是为什么用的是takara 公司的酶

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-03-16 09:37:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ken19860823

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-03-27 08:10:38
EcoRI 和XbaI因为都在多克隆位点，所以相当于线性化载体。载体是4470bp,所以回收旧行。怎么又是你，你们都没有师兄师姐指导的吗？
赞一下(1人) 回复此楼
做基因修饰的老菜鸡
3楼2016-03-16 10:34:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

卡维斯

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
表达载体当然是用大的条带呀，酶是否失效、酶切时间适当延长、质粒提取质量
赞一下 回复此楼
2楼2016-03-16 09:55:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youwid

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看载体图谱或序列，可以知道自己要的是哪段，大小多少。takara的有些酶是不好用，如果实在切不下来就加大酶量或者换个公司的酶。或者一个酶一个酶的切。
赞一下 回复此楼
4楼2016-03-16 10:37:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiao_monv

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个看你需要的是哪个片段了
赞一下 回复此楼
5楼2016-03-16 10:49:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amberhwk

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ken19860823 at 2016-03-16 10:34:02
EcoRI 和XbaI因为都在多克隆位点，所以相当于线性化载体。载体是4470bp,所以回收旧行。怎么又是你，你们都没有师兄师姐指导的吗？

又是我，被你发现了，我师姐研三，已经出去实习，在学校时间很少

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2016-03-16 11:38:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

war3one

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看看公用buffer用的对不对，保证两个酶的效率
赞一下 回复此楼
7楼2016-03-17 13:25:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amberhwk

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by war3one at 2016-03-17 13:25:07
看看公用buffer用的对不对，保证两个酶的效率

Buffer 是对的，按照公司提供的加的

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-03-17 16:28:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peptide3986

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看质粒图谱啊~~~
赞一下 回复此楼
9楼2016-03-17 17:38:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hua_geduo

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的载体的构建完的，还是没有外源片段的？如果需要载体，就回收大的片段；还有不一定非要用Takara的酶，虽然是名牌，切不切的开，看你切的时候的条件，如果一下切不开两个点，可以试试先用一个酶切，再用另一个酶切
赞一下 回复此楼
10楼2016-03-24 16:58:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 amberhwk 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我面上完蛋了 +10 且听虎啸 2026-08-20 11/550 2026-08-25 07:12 by echo8914667
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-25 01:47 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 明天应该可查了！？ +5 chengyan1220 2026-08-23 5/250 2026-08-24 23:28 by 我4大白菜
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-24 21:59 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭