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南宫瑾

新虫 (小有名气)

[交流] PT-PCR

我在做转录组数据的验证，总共有ck,盐处理，盐处理恢复，三个处理，在做RT-pcr验证基因时，三个处理都要验证吗？希望有经验的帮忙解答一下，万分感激！

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1楼2016-03-15 23:04:03
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qwbio

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
南宫瑾: 金币+5 2016-03-16 09:26:12
盐处理组和恢复祖，相对于对照组的相对表达含量分析。如果你觉得试剂盒很贵的化，可以改为10微升体系，设置4个重复孔。
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2楼2016-03-15 23:13:58
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南宫瑾

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qwbio at 2016-03-15 23:13:58
盐处理组和恢复祖，相对于对照组的相对表达含量分析。如果你觉得试剂盒很贵的化，可以改为10微升体系，设置4个重复孔。

我原来做的是20u体系，如果现在改为10u体系，结果可以在一起做比较吗？10u体系的计算方法是不是和20u的一样？

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3楼2016-03-15 23:19:25
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南宫瑾

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qwbio at 2016-03-15 23:13:58
盐处理组和恢复祖，相对于对照组的相对表达含量分析。如果你觉得试剂盒很贵的化，可以改为10微升体系，设置4个重复孔。

如果改为10u体系，那我在程序设置上是不是只需要把体系的体积改过来就可以了，其他程序设置还需要改变吗？由于初步接触，不太懂，所以问题比较多，请见谅

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4楼2016-03-15 23:23:24
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匿名
本帖仅楼主可见
5楼2016-03-15 23:31:08
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xtaqo045

金虫 (小有名气)
3个重复就够了

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6楼2016-03-15 23:31:25
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qwbio

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
南宫瑾: 金币+5 2016-03-16 09:25:28
引用回帖:
4楼: Originally posted by 南宫瑾 at 2016-03-15 23:23:24
如果改为10u体系，那我在程序设置上是不是只需要把体系的体积改过来就可以了，其他程序设置还需要改变吗？由于初步接触，不太懂，所以问题比较多，请见谅
...

是的，但10微升体系对加样操作要更加严格规范，确保每次加样量的精准。
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7楼2016-03-16 00:18:06
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小小逍遥人
要
8楼2016-03-18 13:31:36
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