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guoqin_shiyin银虫 (正式写手)
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[交流]
请问高保真酶对PCR产物酶切和测序有影响吗？
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我用的高保真酶扩增的片段，想直接进行PCR产物酶切，但是担心由于 它的3－5‘端的校正活性对残留，将会在酶切的时候降解已经被内切酶切开的片段末端导致酶切失败，不知道这个可能性有多大呢？ 另外就是Pfu进行PCR扩增的时候，跑多少个循环合适呢？35个循环会不会多了导致出错？ 最后就是听说将PCR产物进行测序的时候，如果是用高保真酶P的话会影响测序的结果，请问这个是真的吗？ |
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