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maoxixi

新虫 (初入文坛)

[求助] overlap pcr 扩增长前段

有人用overlap pcr 融合过两个长片段吗?
我现在有一个总长1.6kb的片段想要融合在一起,设计的片段1长度900bp,片段2长度730bp,第二轮融合的时候也控制了它们的量比较接近,但是总是会在730那里有亮带,而1.6那里是弥散的看不出有没有条带,大家遇到过这种情况吗?该怎么解决呢?我用的延伸时间是三分半,pfu酶

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jackyoung

新虫 (正式写手)

解决方案如下:模板量要少加,第一步的循环可以设置温度梯度。

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CestLaVie
2楼2016-03-14 23:31:03
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