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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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霜落雪

铁虫 (初入文坛)

[求助] 在设计引物时自由能什么样好? 已有1人参与

做巢式pcr的第一对引物,上游引物我设计了两条,设计的两条引物用DNAMAN看结构差不多,都是存在三个小的茎环结构,不过第一个自由能-2.54,第二个自由能1.21;用primer5.0看时两个都存在Hairpin和Dimer,dimer的值都是-10.4。
1.想问一下自由能正负有什么区别
2.dimer超过10可以么
3两条引物选择哪条做好呢,还是都差不多?
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
二聚体的自由能负值越大,结合力越强。-10也可以用,毕竟Tm值明显比PCR的退火温度低。
2楼2016-03-14 10:53:46
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