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在设计引物时自由能什么样好？已有1人参与
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做巢式pcr的第一对引物，上游引物我设计了两条，设计的两条引物用DNAMAN看结构差不多，都是存在三个小的茎环结构，不过第一个自由能-2.54，第二个自由能1.21；用primer5.0看时两个都存在Hairpin和Dimer，dimer的值都是-10.4。 1.想问一下自由能正负有什么区别 2.dimer超过10可以么 3两条引物选择哪条做好呢，还是都差不多？ |
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