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帮我解释一下第二部肽含量测定这个方法的原理吧，谢谢 已有1人参与
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我做的的水包油大豆蛋白乳液胃蛋白酶动力学， 我取乳液1ml，其他按照如图第二部做的，最后测吸光度，目的是测定上清液中的含肽量，以测定水解度。这个方法有问题吗？还有她加三氯乙酸后，加氢氧化钠 ，硫酸铜 是什么原理。虽然写的是双缩脲比色法，但是并没有双缩脲试剂啊。酪蛋白标准曲线需要自己做吗？还是有国标？ 8E5BA30090B11762E451D825CFFE02E6.jpg |
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4楼2016-03-13 08:48:20
zinfly
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
HTC816(sytucom代发): 金币+2, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2016-03-13 20:30:52
sytucom: 感谢应助，谢谢 2016-03-31 20:09:29
HTC816(99503102代发): 金币+3 2016-07-09 12:38:16
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百度一下就好 双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。 实验原理 双缩脲（NH2CONHCONH2）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与二价铜离子形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能够以一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。 此法的优点是较快速 ，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差，不适合微量蛋白的测定。 标曲需要自己做 |
3楼2016-03-12 15:36:18