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HTC816

新虫 (初入文坛)

[求助] 帮我解释一下第二部肽含量测定这个方法的原理吧,谢谢 已有1人参与

我做的的水包油大豆蛋白乳液胃蛋白酶动力学, 我取乳液1ml,其他按照如图第二部做的,最后测吸光度,目的是测定上清液中的含肽量,以测定水解度。这个方法有问题吗?还有她加三氯乙酸后,加氢氧化钠 ,硫酸铜 是什么原理。虽然写的是双缩脲比色法,但是并没有双缩脲试剂啊。酪蛋白标准曲线需要自己做吗?还是有国标?

帮我解释一下第二部肽含量测定这个方法的原理吧,谢谢
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HTC816

新虫 (初入文坛)

没人吗
2楼2016-03-12 10:11:09
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
HTC816(sytucom代发): 金币+2, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2016-03-13 20:30:52
sytucom: 感谢应助,谢谢 2016-03-31 20:09:29
HTC816(99503102代发): 金币+3 2016-07-09 12:38:16
百度一下就好
双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。
实验原理
双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与二价铜离子形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能够以一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。
紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。干扰这一测定的物质主要有:硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。
此法的优点是较快速 ,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差,不适合微量蛋白的测定。

标曲需要自己做
3楼2016-03-12 15:36:18
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HTC816

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zinfly at 2016-03-12 15:36:18
百度一下就好
双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色 ...

谢谢了
4楼2016-03-13 08:48:20
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