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寻一束光

铁虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 269.6
红花: 3
帖子: 134
在线: 40.9小时
虫号: 3738011
注册: 2015-03-14
性别: MM
专业: 生物技术药物

[求助] 超滤质谱筛选中药活性成分的实验谁做过？给我些指导或者告诉我些经验可行？急~拜托了

超滤筛选方法
实验组：分别移取 20ul 20mg/ml的样品溶液和 20ul 15U 的 α-葡萄糖苷酶溶液，加至160μL 10 mmol /L 的醋酸氨溶液中，于 37 ℃ 反应30min 后，移至截留分子量为 10000 的 YM-10 型超滤管中，于离心力 10000g 下超速离心 10 min，向滤膜中加入200μL 10 mmol /L醋酸铵溶液，离心清洗 3 次洗去未结合成分．收集洗脱液用于 LC-MSn分析（shi 1）再向滤膜中加入 200μL 甲醇-水( 体积比 1∶ 1) ，静置30min, 在离心力 10000g 下离心 15 min 释放结合配体，重复 3 次，收集洗脱液用于 LC-MSn分析．
对照组：分别移取 20ul 20mg/ml的样品溶液和 20ul 15U 的 α-葡萄糖苷酶溶液，加至160μL 10 mmol /L 的醋酸氨溶液中，于 37 ℃ 反应 30min 后，移至截留分子量为 10000 的 YM-10 型超滤管中，于离心力 10000g 下超速离心 10 min，向滤膜中加入200μL 10 mmol /L醋酸铵溶液，离心清洗 3 次洗去未结合成分．收集洗脱液用于 LC-MSn分析．(kong 1) 再向滤膜中加入 200μL 甲醇-水( 体积比 1∶ 1) ，静置30min, 在离心力 10000g 下离心 15 min 释放结合配体，重复 3 次，收集洗脱液用于 LC-MSn分析．(kong 2)
结果并没有预期的那样筛选出shi2中的峰比kong2高即为结合配体。

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