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超滤质谱筛选中药活性成分的实验谁做过?给我些指导或者告诉我些经验可行?急~拜托了
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超滤筛选方法 实验组:分别移取 20ul 20mg/ml的样品溶液和 20ul 15U 的 α-葡萄糖苷酶溶液, 加至160μL 10 mmol /L 的醋酸氨溶液中, 于 37 ℃ 反应30min 后, 移至截留分子量为 10000 的 YM-10 型超滤管中, 于离心力 10000g 下超速离心 10 min, 向滤膜中加入200μL 10 mmol /L醋酸铵溶液 , 离心清洗 3 次洗去未结合成分. 收集洗脱液用于 LC-MSn分析(shi 1)再向滤膜中加入 200μL 甲醇-水( 体积比 1∶ 1) ,静置30min, 在离心力 10000g 下离心 15 min 释放结合配体, 重复 3 次, 收集洗脱液用于 LC-MSn分析. 对照组:分别移取 20ul 20mg/ml的样品溶液和 20ul 15U 的 α-葡萄糖苷酶溶液, 加至160μL 10 mmol /L 的醋酸氨溶液中, 于 37 ℃ 反应 30min 后, 移至截留分子量为 10000 的 YM-10 型超滤管中, 于离心力 10000g 下超速离心 10 min, 向滤膜中加入200μL 10 mmol /L醋酸铵溶液 , 离心清洗 3 次洗去未结合成分. 收集洗脱液用于 LC-MSn分析.(kong 1) 再向滤膜中加入 200μL 甲醇-水( 体积比 1∶ 1) ,静置30min, 在离心力 10000g 下离心 15 min 释放结合配体, 重复 3 次, 收集洗脱液用于 LC-MSn分析.(kong 2) 结果并没有预期的那样筛选出shi2中的峰比kong2高即为结合配体。 |
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本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : 超滤质谱.rtf
2016-03-11 22:37:29, 2.47 M
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2楼2017-09-25 14:17:19
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