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杜鹃羽

金虫 (初入文坛)

[交流] SDS-page中loading buffer添加2-ME的影响

各位大侠,近日小弟在纯化蛋白(HIS标签),纯化后跑PAGE,前几次用的loadingbuffer是没有β-巯基乙醇的,跑出来在目的条带附近一直出现两条带(如图1),刚开始不知道,然后又纯化两批,忧伤了一周……之后怀疑哪方面有问题的时候怀疑到loadingbuffer,开始用有β-巯基乙醇的buffer,然后就跑出来一条带(如图2)。现在就是很好奇这是咋回事儿,二硫键?还望各位能指点一二(我的蛋白是大肠杆菌表达,收的包涵体的)

SDS-page中loading buffer添加2-ME的影响
图 1.jpg


SDS-page中loading buffer添加2-ME的影响-1
图 2.jpg
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李敏40409

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1楼: Originally posted by 杜鹃羽 at 2016-03-11 08:44:55
各位大侠,近日小弟在纯化蛋白(HIS标签),纯化后跑PAGE,前几次用的loadingbuffer是没有β-巯基乙醇的,跑出来在目的条带附近一直出现两条带(如图1),刚开始不知道,然后又纯化两批,忧伤了一周……之后怀疑哪方 ...

请问巯基乙醇加多少?

发自小木虫Android客户端
5楼2018-02-01 22:55:39
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虫虫笑了

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也搞不懂为什么,但我自己做的时候感觉加了巯基乙醇之后跑出来的条带细一些,不会很粗
1111
3楼2016-04-06 21:51:46
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RyanKai

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
loading buffer 是一定要加巯基乙醇的
4楼2017-08-29 18:09:21
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