| 查看: 1556 | 回复: 14 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
质粒提取酶切 已有2人参与
|
|||
|
提完质粒可以直接酶切吗，还是说一定要胶回收以后再酶切 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有109人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
ken19860823
木虫 (正式写手)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 3579.2
- 红花: 9
- 帖子: 877
- 在线: 107.4小时
- 虫号: 3150033
- 注册: 2014-04-20
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
amberhwk: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-09 16:20:41
amberhwk: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-09 16:20:41
|
这是很常规的实验啊，质粒是试剂盒提取的么？试剂盒提取质粒后，测量浓度然后用1ug进行双酶切或者分步酶切，切自己需要的带然后胶回收后溶于30ul水。跑胶确认自己回收的片段没问题（1ul就够了），一般会看到对应的单带，载体有时候会发生会连出现类似质粒的带，没有对应大小的单带。这个属于正常，连接片段的时候65度处理2min就可以（记住是加连接酶之前混合片段热处理）。质粒图谱一般是三条带，最亮的是超螺旋结构，其次是开环，最大的是线性化的载体。一般来说质粒质量越好，超螺旋越量，其他带很暗。质粒提取试剂盒提取的质粒是很纯的了，切胶回收一般处理有杂带或者含目的条带的DNA混合物。 |
7楼2016-03-09 13:53:09
2楼2016-03-08 20:43:24
Bioexperixgs
新虫 (正式写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 672.9
- 散金: 337
- 红花: 8
- 帖子: 330
- 在线: 39.2小时
- 虫号: 2330746
- 注册: 2013-03-08
- 专业: 病原微生物变异与耐药
3楼2016-03-08 23:02:26
匿名
用户注销 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1866.5
- 散金: 448
- 红花: 1
- 沙发: 1
- 帖子: 417
- 在线: 76.1小时
- 虫号: 0
- 注册: 2014-10-29
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2016-03-08 23:59:35
