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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 做qRT-PCR的RNA样品反转录之前需要稀释到相同浓度吗？why？
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mlxmiao

木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 曼陀罗的祈祷 at 2016-03-09 11:14:27
如果rna加多了，会不会有什么影响...

rna多少，你逆转录不充分。看说明书，一般总rna最多5微克。

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11楼2016-03-09 11:37:28
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Bioexperixgs

新虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 曼陀罗的祈祷 at 2016-03-09 11:11:50
如果rna浓度相差很大的话，有的甚至只需要零点几微升，有的需要几微升...

预跑的时候是能够从定量分析的图上看出来模板量的。跑完再稀释。如果就得浪费钱，可以用普通pcr扩增一下内参，跑电泳从胶上可以看出模板量的差异，然后稀释模板做qPCR

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12楼2016-03-09 16:47:17
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王爱沫1

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
13楼2016-03-09 17:37:20
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