做qRT-PCR的RNA样品反转录之前需要稀释到相同浓度吗？why？ - 分子生物 - PCR相关

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木虫 (著名写手)

引用回帖:

10楼: Originally posted by 曼陀罗的祈祷 at 2016-03-09 11:14:27
如果rna加多了，会不会有什么影响...

rna多少，你逆转录不充分。看说明书，一般总rna最多5微克。

发自小木虫Android客户端

11楼2016-03-09 11:37:28

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新虫 (正式写手)

引用回帖:

9楼: Originally posted by 曼陀罗的祈祷 at 2016-03-09 11:11:50
如果rna浓度相差很大的话，有的甚至只需要零点几微升，有的需要几微升...

预跑的时候是能够从定量分析的图上看出来模板量的。跑完再稀释。如果就得浪费钱，可以用普通pcr扩增一下内参，跑电泳从胶上可以看出模板量的差异，然后稀释模板做qPCR

发自小木虫Android客户端

12楼2016-03-09 16:47:17

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禁虫 (小有名气)

感谢参与，应助指数 +1

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13楼2016-03-09 17:37:20

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