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fengyuran

新虫 (正式写手)

[求助] 做qRT-PCR的RNA样品反转录之前需要稀释到相同浓度吗?why? 已有3人参与

如题目,谢谢啦!

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曼陀罗的祈祷

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Bioexperixgs at 2016-03-08 22:54:07
预跑一个样,然后调整模板到量差不多。不一定要完全一样浓度,LZ应该需要知道内参的作用!

如果rna浓度相差很大的话,有的甚至只需要零点几微升,有的需要几微升
想做个有趣的人,却在逗比的道路上越走越远~
9楼2016-03-09 11:11:50
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
需要,模板一样的时候反转录效率才是最相近的,反转后的cDNA量一样的时候做PCR才能更好的用起峰时间来表示模板基因的含量。
2楼2016-03-08 14:41:28
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youyou德华

金虫 (小有名气)

最好是在你的反转录体系中就调整,保证总量一致,结果会很好。

发自小木虫Android客户端
3楼2016-03-08 16:06:00
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
需要,通常使用试剂盒进行反转录时需要调整RNA的总量一致,这样反转录效率一致,得到的cDNA的量才相近,不然你就得一遍一遍的标模板,使cDNA量一致。

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4楼2016-03-08 16:27:02
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