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clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] 转化后菌落长成一大片什么原因?

大家好!我用5微升质粒转至100微升BL21感受态中,12小时就长成一大片,这是什么原因阿?是不是质粒的量太多导致的?注:amp没有失效,前天刚用过是有效的,并存放于4度冰箱中。
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mascotte

金虫 (正式写手)


lwf991229(金币+1,VIP+0):嗯,有道理的~
质粒太多了,菌也太多了,BL21的菌落比一般工程菌的菌落大很多,怎么可能不成一片阿?
做阳性转化的时候,用枪头在质粒溶液里沾一下就够了,加到菌液里,热激之后根本不用摇起来,加一倍体积的培养基,取50ul涂板足够用。
4楼2008-10-14 23:59:41
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yfli2006

木虫 (正式写手)

关键是有没有有用的?!
2楼2008-10-14 22:17:13
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飞羽

铁虫 (初入文坛)

有可能是感受态细胞被污染了感受态做的不好,我们也碰到过,试试用别人做的效率比较高的感受态就可能好了。
知足长乐
3楼2008-10-14 23:18:17
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zhongdianshi

银虫 (小有名气)

只涂感受态细胞长吗?
另外,BL21是否可以加氯霉素筛选?
引用回帖:
Originally posted by clf0803 at 2008-10-14 22:12:
大家好!我用5微升质粒转至100微升BL21感受态中,12小时就长成一大片,这是什么原因阿?是不是质粒的量太多导致的?注:amp没有失效,前天刚用过是有效的,并存放于4度冰箱中。

5楼2008-10-15 06:31:06
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