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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 转化后菌落长成一大片什么原因？
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clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] 转化后菌落长成一大片什么原因？

大家好！我用5微升质粒转至100微升BL21感受态中，12小时就长成一大片，这是什么原因阿？是不是质粒的量太多导致的？注：amp没有失效，前天刚用过是有效的，并存放于4度冰箱中。
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1楼 2008-10-14 22:12:38
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yfli2006

木虫 (正式写手)
关键是有没有有用的？！
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2楼2008-10-14 22:17:13
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飞羽

铁虫 (初入文坛)
有可能是感受态细胞被污染了感受态做的不好，我们也碰到过，试试用别人做的效率比较高的感受态就可能好了。
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知足长乐
3楼2008-10-14 23:18:17
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mascotte

金虫 (正式写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):嗯,有道理的~
质粒太多了，菌也太多了，BL21的菌落比一般工程菌的菌落大很多，怎么可能不成一片阿？
做阳性转化的时候，用枪头在质粒溶液里沾一下就够了，加到菌液里，热激之后根本不用摇起来，加一倍体积的培养基，取50ul涂板足够用。
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4楼2008-10-14 23:59:41
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zhongdianshi

银虫 (小有名气)
只涂感受态细胞长吗？
另外，BL21是否可以加氯霉素筛选？
引用回帖:
Originally posted by clf0803 at 2008-10-14 22:12:
大家好！我用5微升质粒转至100微升BL21感受态中，12小时就长成一大片，这是什么原因阿？是不是质粒的量太多导致的？注：amp没有失效，前天刚用过是有效的，并存放于4度冰箱中。

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5楼2008-10-15 06:31:06
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十比

木虫 (著名写手)
是不是把你的转化菌液全部涂平板了啊
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6楼2008-10-15 11:26:42
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qiyaocheng

木虫 (小有名气)

老虫
同意楼上的说法
1，质粒太多
2，涂菌可能太多
3，应该及时观察，尽量不要在探索时过夜
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毕业回望科研路，满目疮痍一身土
7楼2008-10-15 23:01:58
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恩文

铜虫 (小有名气)
会不会是卫星菌落？嘎嘎
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8楼2008-10-16 11:15:16
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧
我现在想让转化效率高啊

可是怎么也高不了

楼主怎么做到的那么高的转化率阿

我也是氯化钙法转大肠杆菌，我用的是DH5a
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____/\~~~/\,----(..)/\____//|(\|(^\/___\/\||__||__|-"
9楼2008-10-16 11:43:43
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luckyyan

新虫 (小有名气)
建议划线试试，我也遇到过这类问题，或者减少菌液用量。
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10楼2008-10-16 20:04:35
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