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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] 转化后菌落长成一大片什么原因?

大家好!我用5微升质粒转至100微升BL21感受态中,12小时就长成一大片,这是什么原因阿?是不是质粒的量太多导致的?注:amp没有失效,前天刚用过是有效的,并存放于4度冰箱中。
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yfli2006

木虫 (正式写手)

关键是有没有有用的?!
2楼2008-10-14 22:17:13
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飞羽

铁虫 (初入文坛)

有可能是感受态细胞被污染了感受态做的不好,我们也碰到过,试试用别人做的效率比较高的感受态就可能好了。
知足长乐
3楼2008-10-14 23:18:17
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mascotte

金虫 (正式写手)


lwf991229(金币+1,VIP+0):嗯,有道理的~
质粒太多了,菌也太多了,BL21的菌落比一般工程菌的菌落大很多,怎么可能不成一片阿?
做阳性转化的时候,用枪头在质粒溶液里沾一下就够了,加到菌液里,热激之后根本不用摇起来,加一倍体积的培养基,取50ul涂板足够用。
4楼2008-10-14 23:59:41
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zhongdianshi

银虫 (小有名气)

只涂感受态细胞长吗?
另外,BL21是否可以加氯霉素筛选?
引用回帖:
Originally posted by clf0803 at 2008-10-14 22:12:
大家好!我用5微升质粒转至100微升BL21感受态中,12小时就长成一大片,这是什么原因阿?是不是质粒的量太多导致的?注:amp没有失效,前天刚用过是有效的,并存放于4度冰箱中。

5楼2008-10-15 06:31:06
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十比

木虫 (著名写手)

是不是把你的转化菌液全部涂平板了啊
6楼2008-10-15 11:26:42
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qiyaocheng

木虫 (小有名气)

老虫

同意楼上的说法
1,质粒太多
2,涂菌可能太多
3,应该及时观察,尽量不要在探索时过夜
毕业回望科研路,满目疮痍一身土
7楼2008-10-15 23:01:58
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恩文

铜虫 (小有名气)

会不会是卫星菌落?嘎嘎
8楼2008-10-16 11:15:16
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧

我现在想让转化效率高啊

可是怎么也高不了

楼主怎么做到的那么高的转化率阿

我也是氯化钙法转大肠杆菌,我用的是DH5a
____/\~~~/\,----(..)/\____//|(\|(^\/___\/\||__||__|-"
9楼2008-10-16 11:43:43
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luckyyan

新虫 (小有名气)

建议划线试试,我也遇到过这类问题,或者减少菌液用量。
10楼2008-10-16 20:04:35
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