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Lee_log

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于hplc内标法的问题 已有1人参与

本科三年级一枚,跟随研二师姐做关于微生物降解污染物的实验。用的标准曲线法测降解后的含量,由于实验室的液相六通阀漏液,对于同一个样品,测出来的峰面积常常会越来越大(就算定量进样,感觉被带进到柱子里的量还是会变)。由于短时间内还要用这个坏的仪器,我就想,能不能用内标法去尽量减少这种误差。我想以前外标误差的原因是进到柱子里的样品量不正常,而内标法是对进样量和操作手法要求并没有十分严格。我想到的是以下:配制已知浓度的梯度标液,加入定量的标准物。对于同一针进样,Ci/Cs=fiAi/fsAs,由此标液求得(fi/fs)=Rf,对未知浓度测样也保持相同标准物,那么未知样品浓度即为C=(Rf*Cs)*(A/As)。小生不才,想的东西乱且不知对错。还望各位前辈点拨。

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木易十日十月

金虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Lee_log at 2016-03-07 22:48:38
那个随着进样次数增多,进样口会自己滴液下来。做标曲的时候可能浓度跨度较大,而且只做前面几次,标曲也很准。只是后来我们测降解程度,十几个样,大家降解程度差不多的时候,重复测的时候发现重复性不好。我们当 ...

好吧,不过你说的肯定不是阀漏液,7725i?进样阀废液出口要与进样针保持同一高度,会有虹吸的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2016-03-08 09:53:16
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

做实验,能不能多一点严谨和准确呢?仪器有问题,还是应该避免
2楼2016-03-07 16:41:38
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duliuhui

金虫 (正式写手)

在一定范围内內标法能改善进样量不准的定量问题,但配制样品时要注意內标量的准确和一致。如果标曲没有问题基本可以的。在仪器问题实在没法解决的情况下可以试试的。

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3楼2016-03-07 19:29:04
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Lee_log

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2016-03-07 16:41:38
做实验,能不能多一点严谨和准确呢?仪器有问题,还是应该避免

嗯,这样想想也是我不对。现在实验还在摸索阶段,所以…可能我乱想了吧

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4楼2016-03-07 19:29:35
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