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LHD-1

木虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂糖电泳后,胶上这些花白的东西是什么?怎么形成的,如何避免? 已有8人参与

takara胶 ,浓度1.5%,电泳缓冲液为TAE

琼脂糖电泳后,胶上这些花白的东西是什么?怎么形成的,如何避免?


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a314919473

银虫 (著名写手)

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感谢参与,应助指数 +1
我来说两点:
胶块下面乱七八糟的是你 制胶板 不干净,倒胶前清洗制胶板就好了。
条带跑的不理想我觉得是你胶放置的时间太久或者是你电泳缓冲液和胶的浓度不一致。
有你真好
7楼2016-03-08 10:55:19
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豆子的星空

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、胶板有点脏;
2、条带不直,根据我的经验是梳子没拔好或跑胶时候没有摆正;
3、拖尾严重,建议重新扩增,不过还得看你用来做什么;
4、EB没有溶解均匀;
5、制胶时没有充分加热,应该透亮无杂质;
Idobelieve
10楼2016-03-09 15:06:07
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普通回帖

woshiafan

铁虫 (初入文坛)

你好,我觉得你的胶有明显的拖带,关于拖带的原因你可以百度搜索一下,另外,我们一般用1%的胶,电泳时间40分钟,你可以选择参考一下。祝顺利!

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学习、交流、共同进步^^
2楼2016-03-07 18:37:18
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香蕉芒果99

新虫 (小有名气)

3楼2016-03-07 19:06:07
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
M都拖尾了,通常是胶的问题,没有溶解充分;也有可能是电泳过程中电压不一,造成胶的局部变热软化。
4楼2016-03-07 20:42:35
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wangji1973

新虫 (初入文坛)

可能是胶没有溶解好,或加EB时没混匀

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5楼2016-03-07 21:02:28
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兰兰园丁

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
减少上样量,你的胶图很脏,建议勤换电泳液,制胶的东西也保持干净,清理干净成像仪。

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6楼2016-03-08 00:16:10
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sunlk

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
制胶板没有洗干净,胶没有充分融化好,或者已经接近凝固了才倒胶;
很给力
8楼2016-03-08 10:56:46
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MarchZR

银虫 (小有名气)

拖尾太严重,另外是不是反应体系优点问题,尾拖的那么亮啊,而且胶上也有基因???你是什么染色方法
参考一下资料:PCR标准操作流程:http://www.detaibio.com/topics/pcr-sop.html~
9楼2016-03-08 15:34:16
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