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91candy

铁虫 (小有名气)

[求助] gst融合蛋白表达,酶切蛋白后,蛋白无活性是什么原因?

最近在做gst标签的融合蛋白表达,纯化的通和蛋白经凝血酶切割后,跑sds-page凝胶,可以形成两条带(一条gst标签带,一条目的蛋白带)。蛋白经抑菌实验,显示没有抑菌效果,我做的的细菌通透性增加蛋白。在抑菌实验过程中标签和目的蛋白没有进行分离。
想请教一下大家,有没有遇到类似问题的。
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yuanxiaoxin

新虫 (初入文坛)

想问下楼主买的凝血酶是从哪儿买的
2楼2016-03-29 15:24:54
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91candy

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuanxiaoxin at 2016-03-29 15:24:54
想问下楼主买的凝血酶是从哪儿买的

索莱宝的
3楼2016-03-29 19:33:52
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

分离的目的蛋白,你是怎么纯化出来的
4楼2016-05-13 11:55:46
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20081118129

新虫 (著名写手)

Drake

你好!我也在做GST标签蛋白的纯化,用的是谷胱甘肽琼脂糖4B纯化树脂,但是我没有做过,你可以把你的方法和缓冲液那些发给我一下吗??非常感谢!!!

发自小木虫IOS客户端
5楼2016-05-26 23:56:45
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chongju135

木虫 (著名写手)

切前有没检测出活性?
6楼2016-05-27 16:38:29
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