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cys452008

金虫 (小有名气)

[求助] 关于DNA传感器 已有4人参与

之前一直做的是葡萄糖多巴胺一类的检测,最近准备入手DNA方面的工作,现在有一个问题,因为实验室这块一直是空白,所以想问问,DNA准备在生工购买,但他的购买单位是OD,请问这个单位是什么意思,如果我配置浓度为10的-6次方的DNA溶液需要购买多少的量?5 OD可以配出多少溶液,请有经验的前辈前来指点一下,不胜感激...
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雪千寻丶

新虫 (初入文坛)

生工的DNA是1OD加70μL缓冲液配置成100μM的贮存液,你自己需要好多还请你自己计算一下吧
3楼2016-03-07 13:55:46
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olea

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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cys452008: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-08 15:19:34
因为DNA(或RNA)是由一个个碱基组成的,而碱基一般在260 nm会有吸收,根据吸收情况可以确定碱基的浓度,单位一般是ug/mL,然后根据DNA的分子量可以算出摩尔浓度,这里的分子量通常跟链长也就是碱基多少有关,计算一般是用的碱基的平均分子量,单、双链等都有区别。10-6没有单位哈,是浓度还是物质量呢?修饰电极的话,可以买个5OD,一段时间没买了,不记得是不是5OD一下是差不多的价格。一般生工给的都会附有简单计算的浓度,比方说加多少uL水可以得到100 uM等等,离心之后加相应的水就可以了。
6楼2016-03-07 16:40:36
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1 OD大约是33 μg
楼主用这个数字估算一下需要量就是了。真正合成以后生工会给每一种合成的DNA链一份详细的说明书,写明一共是多少μmol,加多少水配成指定浓度的溶液母液。
11楼2016-03-08 15:31:59
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普通回帖

cys452008

金虫 (小有名气)

有没有人
2楼2016-03-07 10:47:54
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cys452008

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 雪千寻丶 at 2016-03-07 13:55:46
生工的DNA是1OD加70μL缓冲液配置成100μM的贮存液,你自己需要好多还请你自己计算一下吧

缓冲液用什么?Tris 吗?
4楼2016-03-07 15:05:05
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雪千寻丶

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cys452008 at 2016-03-07 15:05:05
缓冲液用什么?Tris 吗?...

这个得看你的实验要求了啊
5楼2016-03-07 15:22:28
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olea

专家顾问 (著名写手)

一般用水就可以了,需要反应的时候在加入适量缓冲液稀释。
特别是量比较大,一次用不完需要分装后重新冷冻的时候用水比较好,用缓冲液冷冻可能会析出盐
7楼2016-03-07 16:51:05
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MyMyMyMy

铜虫 (初入文坛)

请问楼主要做哪方面的工作?有没有涉及到小分子检测
8楼2016-03-08 09:08:11
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xuesunshine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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cys452008: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-08 15:19:53
DNA的分子量与碱基组成有关系,所以相同OD的DNA配成微摩尔级的溶液,得到的体积是不一样的,生工的订单上会有详细的步骤的,包括加多少体积的水。
9楼2016-03-08 14:13:18
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cys452008

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by MyMyMyMy at 2016-03-08 09:08:11
请问楼主要做哪方面的工作?有没有涉及到小分子检测

主要做电化学传感器,准备先入手做点DNA杂交检测之类的,后面可能会进一步做点抗性方面的实验,不一定。
10楼2016-03-08 15:21:50
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