应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 毕赤酵母表达原核来源的酶
51/1返回列表
查看: 1048  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

肉肉肉.

铁虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母表达原核来源的酶 已有1人参与

各位大神好！我又有问题了！
我要把一个原核来源的酶在真核毕赤酵母中表达 但是这个原核来源的酶的起始密码子是TTG不是ATG，酵母是否能识别呢？我是要把TTG改为ATG呢还是说在TTG前面加一个ATG呢？还是说不变也能表达？
多谢大神啦！！救救我呀！！！

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白表达纯化鉴定精华

» 猜你喜欢
1楼 2016-03-02 14:57:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我实验室这边的经验是，要去掉原蛋白上的信号肽。如果需要信号肽的话，应该换成酵母识别的信号肽。信号肽之后接目的蛋白，是什么氨基酸序列，就用什么序列，没有必要非换成ATG。当然，具体还要看你要重组蛋白做什么，比如这个酶，如果第一个氨基酸不是M ，非要加个M，会不会影响活性，都不好说。
赞一下 回复此楼
5楼2016-03-03 20:02:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

肉肉肉.

铁虫 (小有名气)


发自小木虫IOS客户端
2楼2016-03-02 15:07:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
肉肉肉.: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2016-03-02 20:44:23
必须要改成ATG。否则酵母不识别。其实，你在什么宿主中表达，就用该宿主的偏好密码子。另外，你在酵母中表达原核生物的酶，你看看氨基酸序列中有没有糖基化位点，我的经验是，酵母表达原核蛋白后，会发生糖基化，这可能是你不需要，或者你不想要的。
赞一下 回复此楼
3楼2016-03-02 19:55:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肉肉肉.

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-03-02 19:55:18
必须要改成ATG。否则酵母不识别。其实，你在什么宿主中表达，就用该宿主的偏好密码子。另外，你在酵母中表达原核生物的酶，你看看氨基酸序列中有没有糖基化位点，我的经验是，酵母表达原核蛋白后，会发生糖基化，这 ...

谢谢大神！现在发现前面是一段信号肽，是否需要去掉信号肽再在毕赤酵母中表达呢？去掉之后再加上ATG起始子可行吗？跪谢啦！！！

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-03-02 20:44:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭