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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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肉肉肉.

铁虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母表达原核来源的酶 已有1人参与

各位大神好！我又有问题了！
我要把一个原核来源的酶在真核毕赤酵母中表达 但是这个原核来源的酶的起始密码子是TTG不是ATG，酵母是否能识别呢？我是要把TTG改为ATG呢还是说在TTG前面加一个ATG呢？还是说不变也能表达？
多谢大神啦！！救救我呀！！！

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1楼 2016-03-02 14:57:42
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肉肉肉.

铁虫 (小有名气)


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2楼2016-03-02 15:07:14
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
肉肉肉.: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2016-03-02 20:44:23
必须要改成ATG。否则酵母不识别。其实，你在什么宿主中表达，就用该宿主的偏好密码子。另外，你在酵母中表达原核生物的酶，你看看氨基酸序列中有没有糖基化位点，我的经验是，酵母表达原核蛋白后，会发生糖基化，这可能是你不需要，或者你不想要的。
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3楼2016-03-02 19:55:18
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肉肉肉.

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-03-02 19:55:18
必须要改成ATG。否则酵母不识别。其实，你在什么宿主中表达，就用该宿主的偏好密码子。另外，你在酵母中表达原核生物的酶，你看看氨基酸序列中有没有糖基化位点，我的经验是，酵母表达原核蛋白后，会发生糖基化，这 ...

谢谢大神！现在发现前面是一段信号肽，是否需要去掉信号肽再在毕赤酵母中表达呢？去掉之后再加上ATG起始子可行吗？跪谢啦！！！

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4楼2016-03-02 20:44:16
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我实验室这边的经验是，要去掉原蛋白上的信号肽。如果需要信号肽的话，应该换成酵母识别的信号肽。信号肽之后接目的蛋白，是什么氨基酸序列，就用什么序列，没有必要非换成ATG。当然，具体还要看你要重组蛋白做什么，比如这个酶，如果第一个氨基酸不是M ，非要加个M，会不会影响活性，都不好说。
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5楼2016-03-03 20:02:42
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-03-02 19:55:18
必须要改成ATG。否则酵母不识别。其实，你在什么宿主中表达，就用该宿主的偏好密码子。另外，你在酵母中表达原核生物的酶，你看看氨基酸序列中有没有糖基化位点，我的经验是，酵母表达原核蛋白后，会发生糖基化，这 ...

请问如何看有无糖基化位点呢？

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6楼2017-11-21 22:44:14
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