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[交流]
用质谱去检测组蛋白修饰中遇到的蛋白衍生化的问题！
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课题需要用LC-MS/MS去检测组蛋白上的修饰位点，查看各种文献后都提到要在酶解消化前对组蛋白进行衍生化处理，所用的衍生化试剂基本也都是丙酸酐，但是在操作过程中发现，用丙酸酐去衍生化组蛋白时会产生大量的盐，而这些盐通过除盐柱又很难除干净，导致上质谱时很容易弄脏柱子，甚至是质谱仪，有没有大神在这方面有经验的，指点一下，不胜感激！！！ 我用的衍生化方法是 丙酸酐：甲醇=3：1 混合，随后按 组蛋白质量：混合后试剂体积=1：4 反应，用氨水调pH至8，51度水浴反应20分钟。 |
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