| 查看: 6275 | 回复: 1 | ||
[求助]
关于体外转录前DNA质粒模板的线性化
|
|
最近在做感染性克隆相关的实验，已经构件好了DNA模版，下一步进行体外转录，之后转染细胞，有几个问题不太清楚： 1 在线性化酶切DNA模版链前，DNA模版质粒的浓度要达到多少（微克/微升）转录效果比较好？ 2 一般正常体系酶切需要多长时间可以保证质粒充分切割？ 3 很多体外转录试剂盒（mMESSAGE mMACHINE® Kit/MEGAscript® Kit）的说明书上介绍，酶切质粒之后需要加入EDTA，醋酸铵和乙醇等试剂来终止酶切，之后离心去上清浓缩质粒再用dH2O或TE buffer，请问做过相关实验的朋友在实验中是否这样处理了呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有57人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
饿的神啊
新虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 5982.7
- 散金: 122
- 帖子: 1004
- 在线: 66.3小时
- 虫号: 2477988
- 注册: 2013-05-23
- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
2楼2017-09-15 12:35:16
