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南山五柳生

铁虫 (小有名气)

[求助] 酶如何灭菌(跪问~~) 已有1人参与

大家好,最近我在做植物细胞酶解去壁实验,关于酶液的灭菌我是这样做的:酶液配制好后,4000rpm 4度离心,取上清过0.45um滤膜(过渡一下),再过0.22um滤膜除菌。但问题是,我在第二步过0.45um滤膜时就卡住了,太难过滤了,我用的是平时做液相的微孔滤膜。咋办呢,请高手指点~~
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十比

木虫 (著名写手)

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感谢参与,应助指数 +1
配酶液时,55加热10分钟左右有利于酶的溶解,然后用滤膜过滤除菌就行,为什么要搞2次。如果量大卡住了就换新的滤膜。
2楼2016-03-02 10:55:48
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youyou德华

金虫 (小有名气)

滤膜有水相的和有机相的之分,别用错了

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3楼2016-03-02 16:01:51
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南山五柳生

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 十比 at 2016-03-02 10:55:48
配酶液时,55加热10分钟左右有利于酶的溶解,然后用滤膜过滤除菌就行,为什么要搞2次。如果量大卡住了就换新的滤膜。

加热会不会影响酶的活性呀,还要不要用低温离心机?

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4楼2016-03-02 17:26:04
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南山五柳生

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by youyou德华 at 2016-03-02 16:01:51
滤膜有水相的和有机相的之分,别用错了

好滴,多谢!

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5楼2016-03-02 17:26:50
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十比

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
南山五柳生: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-03-02 19:11:03
引用回帖:
4楼: Originally posted by 南山五柳生 at 2016-03-02 17:26:04
加热会不会影响酶的活性呀,还要不要用低温离心机?
...

用不用低温关系不大,酶液最好现配现用,负20保存超过一周效果就明显下降。

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6楼2016-03-02 17:39:50
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