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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 酶如何灭菌（跪问~~）
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南山五柳生

铁虫 (小有名气)

[求助] 酶如何灭菌（跪问~~） 已有1人参与

大家好，最近我在做植物细胞酶解去壁实验，关于酶液的灭菌我是这样做的：酶液配制好后，4000rpm 4度离心，取上清过0.45um滤膜（过渡一下），再过0.22um滤膜除菌。但问题是，我在第二步过0.45um滤膜时就卡住了，太难过滤了，我用的是平时做液相的微孔滤膜。咋办呢，请高手指点~~
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1楼 2016-03-01 17:40:04
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十比

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
配酶液时，55加热10分钟左右有利于酶的溶解，然后用滤膜过滤除菌就行，为什么要搞2次。如果量大卡住了就换新的滤膜。
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2楼2016-03-02 10:55:48
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youyou德华

金虫 (小有名气)
滤膜有水相的和有机相的之分，别用错了

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3楼2016-03-02 16:01:51
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南山五柳生

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 十比 at 2016-03-02 10:55:48
配酶液时，55加热10分钟左右有利于酶的溶解，然后用滤膜过滤除菌就行，为什么要搞2次。如果量大卡住了就换新的滤膜。

加热会不会影响酶的活性呀，还要不要用低温离心机？

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4楼2016-03-02 17:26:04
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南山五柳生

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by youyou德华 at 2016-03-02 16:01:51
滤膜有水相的和有机相的之分，别用错了

好滴，多谢！

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5楼2016-03-02 17:26:50
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十比

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
南山五柳生: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-03-02 19:11:03
引用回帖:
4楼: Originally posted by 南山五柳生 at 2016-03-02 17:26:04
加热会不会影响酶的活性呀，还要不要用低温离心机？
...

用不用低温关系不大，酶液最好现配现用，负20保存超过一周效果就明显下降。

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6楼2016-03-02 17:39:50
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