应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 求助关于大肠高密度发酵自溶
131/2返回列表12下一页
查看: 2105  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lfwvm8

铁虫 (小有名气)

[求助] 求助关于大肠高密度发酵自溶 已有2人参与

最近在做大肠发酵，BL21DE3,表达蛋白。用半合成培养基，发酵前期采用间歇式补料，中后期稳定补料，设计周期是30h。现在遇到的问题是发酵到20h以后DO会突然快速下降，5L罐子DO下降后调慢补料后DO会重新维持稳定，菌体也没有自溶；500L罐子DO开始下降后就会快速自溶。求大神帮忙分析下原因～

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

高密度发酵

» 猜你喜欢
1楼 2016-03-01 14:52:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

棘白菌素

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lfwvm8 at 2016-03-01 16:31:48
补料是持续稳定流加的。你的意思是这个时候补料速度可能不够吗？
...

一般做高密度发酵在初始糖源耗完之后，会出现DO上升的情况，这个时候补料诱导，DO会下降至一定水平后稳定；而你的实验是一直在补料，碳源保持充足，DO下降可能说明你的菌在快速增长繁殖时期，调慢补料后进入饥饿培养，控制了菌的比生长速率，DO稳定在一个较低水平也是可以理解的；如果500L也开始一直下降，菌体量如果增加明显，说明你补料速度可能大了，如果像你说的出现自溶现象，那么建议你注意发酵液的澄清度和起泡情况，因为有可能是感染噬菌体；重复试验几次，换个设备，如果都是这样，再找找是不是有其他因素没有发现。希望能帮到你
赞一下(1人) 回复此楼
青春留不住，白发自然生！
6楼2016-03-01 17:26:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

棘白菌素

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lfwvm8: 金币+10, ★有帮助, 谢谢回帖~ 2016-03-06 19:22:39
lfwvm8: 金币+2, ★有帮助 2016-04-18 16:48:46
还是要确保补料及时
赞一下 回复此楼
青春留不住，白发自然生！
2楼2016-03-01 16:12:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lfwvm8: 金币+10, ★有帮助, 谢谢回帖~ 2016-03-06 19:23:15
lfwvm8: 金币+5, ★有帮助 2016-04-18 16:49:16
PH值有变化时开始补料，用补料的方法来控PH。
赞一下 回复此楼
希望大家多多交流。
3楼2016-03-01 16:28:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lfwvm8

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 棘白菌素 at 2016-03-01 16:12:10
还是要确保补料及时

补料是持续稳定流加的。你的意思是这个时候补料速度可能不够吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-03-01 16:31:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lfwvm8

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2016-03-01 16:28:05
PH值有变化时开始补料，用补料的方法来控PH。

氨水自动调节pH，补料稳定后pH基本没波动～是停止补料，停止加氨水后，pH上升后再补料吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-03-01 16:34:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lfwvm8

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 棘白菌素 at 2016-03-01 17:26:00
一般做高密度发酵在初始糖源耗完之后，会出现DO上升的情况，这个时候补料诱导，DO会下降至一定水平后稳定；而你的实验是一直在补料，碳源保持充足，DO下降可能说明你的菌在快速增长繁殖时期，调慢补料后进入饥饿培 ...

这个是一次5L发酵DO变化图
求助关于大肠高密度发酵自溶



发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-03-01 17:50:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lfwvm8

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 棘白菌素 at 2016-03-01 17:26:00
一般做高密度发酵在初始糖源耗完之后，会出现DO上升的情况，这个时候补料诱导，DO会下降至一定水平后稳定；而你的实验是一直在补料，碳源保持充足，DO下降可能说明你的菌在快速增长繁殖时期，调慢补料后进入饥饿培 ...

自溶排除噬菌体和染菌问题后还有可能是什么原因引起呢？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-03-01 17:54:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
引用回帖:
5楼: Originally posted by lfwvm8 at 2016-03-01 16:34:29
氨水自动调节pH，补料稳定后pH基本没波动～是停止补料，停止加氨水后，pH上升后再补料吗？
...

PH一开始变化时不用氨水控，直接用补料的方法来控试试，我们上罐就是用的这种方法，效果还不错的。
赞一下 回复此楼
希望大家多多交流。
9楼2016-03-02 09:26:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lindench

专家顾问 (文坛精英)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lfwvm8 at 2016-03-01 17:54:59
自溶排除噬菌体和染菌问题后还有可能是什么原因引起呢？
...

如何排除噬菌体的污染？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2016-03-02 09:43:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lfwvm8 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 化学专业申博 +3 赵子羊 2026-05-23 4/200 2026-05-24 18:10 by 工大学长
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 1rx34o113h 2026-05-23 3/150 2026-05-24 17:41 by 0i3mu4vkjz
[基金申请] 评审有感 +16 popular289 2026-05-18 27/1350 2026-05-24 17:34 by hhs666
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 hvkbtfonbv 2026-05-23 4/200 2026-05-24 17:21 by 75ui6h7z2t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 17:10 by 75ui6h7z2t
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 17:01 by 75ui6h7z2t
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 4/200 2026-05-24 16:16 by hhx1yx9evi
[基金申请] 河北省自然科学基金 +6 Peterchao 2026-05-18 9/450 2026-05-24 16:02 by 130067131
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 pmo95bazuy 2026-05-23 8/400 2026-05-24 15:56 by 1uy1ht2y9r
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路！ +4 zju2000 2026-05-21 5/250 2026-05-24 09:35 by songwz
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[论文投稿] 投稿求助，期刊 +4 希冀，有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀，有书读
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[有机交流] 反应很差，大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博，可以边工作边读全日制嘛？ 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭