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lfwvm8

铁虫 (小有名气)

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[求助] 求助关于大肠高密度发酵自溶已有2人参与

最近在做大肠发酵，BL21DE3,表达蛋白。用半合成培养基，发酵前期采用间歇式补料，中后期稳定补料，设计周期是30h。现在遇到的问题是发酵到20h以后DO会突然快速下降，5L罐子DO下降后调慢补料后DO会重新维持稳定，菌体也没有自溶；500L罐子DO开始下降后就会快速自溶。求大神帮忙分析下原因～

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高密度发酵

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1楼 2016-03-01 14:52:05

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棘白菌素

铜虫 (正式写手)

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引用回帖:

4楼: Originally posted by lfwvm8 at 2016-03-01 16:31:48
补料是持续稳定流加的。你的意思是这个时候补料速度可能不够吗？
...

一般做高密度发酵在初始糖源耗完之后，会出现DO上升的情况，这个时候补料诱导，DO会下降至一定水平后稳定；而你的实验是一直在补料，碳源保持充足，DO下降可能说明你的菌在快速增长繁殖时期，调慢补料后进入饥饿培养，控制了菌的比生长速率，DO稳定在一个较低水平也是可以理解的；如果500L也开始一直下降，菌体量如果增加明显，说明你补料速度可能大了，如果像你说的出现自溶现象，那么建议你注意发酵液的澄清度和起泡情况，因为有可能是感染噬菌体；重复试验几次，换个设备，如果都是这样，再找找是不是有其他因素没有发现。希望能帮到你