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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 酵母能在YNB（无硫酸铵）培养基上生长吗？
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cofe

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母能在YNB（无硫酸铵）培养基上生长吗？

实验情况如下：
材料：酵母菌株（Ura缺陷；铵转运蛋白缺陷），空质粒（Ura表达），重组质粒（Ura表达，X蛋白表达）；
培养基：YNB，YNB+铵
目的：X蛋白能否互补酵母氨转运蛋白缺陷；
结果：1. 酵母菌株不能在YNB，YNB+铵培养基上生长（因为Ura缺陷）；
           2. 空质粒（Ura表达）转化酵母菌株均能在YNB，YNB+铵培养基上生长；
           3. 重组质粒（Ura表达，X蛋白表达）转化酵母菌株均能在YNB，YNB+铵培养基上生长；
问题：理想结果是
          a. 所有转化酵母菌株不能在YNB生长（因为缺AA和无机氮），
          b. 空质粒转化酵母菌株不能在YNB+铵培养基上生长（因为铵转运蛋白缺陷），
          c. 重组质粒转化酵母菌株能在YNB+铵培养基上生长（因为X蛋白表达互补缺陷）；
出现上述结果可能是什么原因呢？或者有没更好的实验设计？
谢谢！
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1楼 2016-03-01 14:06:55
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cofe

金虫 (小有名气)
顶上去看看有没有人回答下。
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2楼2016-03-02 13:34:47
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hmgder

新虫 (初入文坛)
刚刚开始准备做酵母杂交，有两个小问题想请教
1. 酵母转化过程中没有抗生素，全程要在无菌台操作吗？那水浴和离心过程怎么办呢
2. 不知道你们用电转化还是醋酸锂，化学转化30度水浴紧接着就是42度水浴，要准备两个水浴锅吗

问题很傻，谢谢你的解答~
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3楼2016-03-03 20:01:52
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钟颖小确幸

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hmgder at 2016-03-03 20:01:52
刚刚开始准备做酵母杂交，有两个小问题想请教
1. 酵母转化过程中没有抗生素，全程要在无菌台操作吗？那水浴和离心过程怎么办呢
2. 不知道你们用电转化还是醋酸锂，化学转化30度水浴紧接着就是42度水浴，要准备两个 ...

根据你的酵母类型选者氯化锂或者醋酸锂，毕赤酵母用氯化锂，酿酒酵母则是用醋酸锂；毕赤酵母时转化30度水浴30min；紧接着就是42度水浴20-25min
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4楼2017-04-07 11:28:44
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