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cofe

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母能在YNB(无硫酸铵)培养基上生长吗?

实验情况如下:
材料:酵母菌株(Ura缺陷;铵转运蛋白缺陷),空质粒(Ura表达),重组质粒(Ura表达,X蛋白表达);
培养基:YNB,YNB+铵
目的:X蛋白能否互补酵母氨转运蛋白缺陷;
结果:1. 酵母菌株不能在YNB,YNB+铵培养基上生长(因为Ura缺陷);
           2. 空质粒(Ura表达)转化酵母菌株均能在YNB,YNB+铵培养基上生长;
           3. 重组质粒(Ura表达,X蛋白表达)转化酵母菌株均能在YNB,YNB+铵培养基上生长;
问题:理想结果是
          a. 所有转化酵母菌株不能在YNB生长(因为缺AA和无机氮),
          b. 空质粒转化酵母菌株不能在YNB+铵培养基上生长(因为铵转运蛋白缺陷),
          c. 重组质粒转化酵母菌株能在YNB+铵培养基上生长(因为X蛋白表达互补缺陷);
出现上述结果可能是什么原因呢?或者有没更好的实验设计?
谢谢!
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钟颖小确幸

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hmgder at 2016-03-03 20:01:52
刚刚开始准备做酵母杂交,有两个小问题想请教
1. 酵母转化过程中没有抗生素,全程要在无菌台操作吗?那水浴和离心过程怎么办呢
2. 不知道你们用电转化还是醋酸锂,化学转化30度水浴紧接着就是42度水浴,要准备两个 ...

根据你的酵母类型选者氯化锂或者醋酸锂,毕赤酵母用氯化锂,酿酒酵母则是用醋酸锂;毕赤酵母时转化30度水浴30min;紧接着就是42度水浴20-25min
4楼2017-04-07 11:28:44
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cofe

金虫 (小有名气)

顶上去看看有没有人回答下。
2楼2016-03-02 13:34:47
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hmgder

新虫 (初入文坛)

刚刚开始准备做酵母杂交,有两个小问题想请教
1. 酵母转化过程中没有抗生素,全程要在无菌台操作吗?那水浴和离心过程怎么办呢
2. 不知道你们用电转化还是醋酸锂,化学转化30度水浴紧接着就是42度水浴,要准备两个水浴锅吗

问题很傻,谢谢你的解答~
3楼2016-03-03 20:01:52
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