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大肠杆菌OD值越摇越低 已有2人参与
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| 用大肠杆菌表达蛋白，培养基是TB，第一次测OD值0.71，过了十分钟后再测变成了0.34，听师兄师姐们说是溶菌，这是怎么回事，请各位大神赐教！小女子感激不尽！（同批次用LB培养基摇的菌没有问题） |
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4楼2016-02-29 11:05:18
原海亮
木虫 (著名写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蓬山远音: 金币+5 2016-02-29 11:04:41
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蓬山远音: 金币+5 2016-02-29 11:04:41
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应该是噬菌体污染导致菌体自溶，在进行摇瓶或中小试尝尝会出现这些问题，而且这种自溶的菌液不要随意倾倒，尽量经过热处理后专门处理。如果没有下游大批量发酵生产，那么可以简单换一个正确转化子进行诱导表达，或者重新转化。当然溶菌现象有一定随机性，和实验室环境有关，尽量避免噬菌体污染需要注意:维持实验室整洁；构建好的克隆质粒可以在90°煮半小时，再转化感受态细胞；验证正确的克隆，在进行摇瓶表达前，甘油管转接到最后摇瓶，可以不加抗性。祝好！ 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-02-28 20:44:01
hc-material
专家顾问 (职业作家)
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蓬山远音3楼2016-02-29 10:39:34
5楼2016-03-01 19:08:15
200