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大肠杆菌OD值越摇越低 已有2人参与
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| 用大肠杆菌表达蛋白,培养基是TB,第一次测OD值0.71,过了十分钟后再测变成了0.34,听师兄师姐们说是溶菌,这是怎么回事,请各位大神赐教!小女子感激不尽!(同批次用LB培养基摇的菌没有问题) |
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原海亮
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蓬山远音: 金币+5 2016-02-29 11:04:41
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应该是噬菌体污染导致菌体自溶,在进行摇瓶或中小试尝尝会出现这些问题,而且这种自溶的菌液不要随意倾倒,尽量经过热处理后专门处理。如果没有下游大批量发酵生产,那么可以简单换一个正确转化子进行诱导表达,或者重新转化。当然溶菌现象有一定随机性,和实验室环境有关,尽量避免噬菌体污染需要注意:维持实验室整洁;构建好的克隆质粒可以在90°煮半小时,再转化感受态细胞;验证正确的克隆,在进行摇瓶表达前,甘油管转接到最后摇瓶,可以不加抗性。祝好! 发自小木虫Android客户端 |

2楼2016-02-28 20:44:01
hc-material
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3楼2016-02-29 10:39:34
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5楼2016-03-01 19:08:15
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