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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » Southern Blots求助
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kaka369

新虫 (小有名气)

[交流] Southern Blots求助

最近一直在做Southern Blots， 两周过去了，可是还是没有结果。小菜鸟第一次做Southern， 请各位高手看看问题出在什么地方！！！！！！
我们实验室用的GE的盒子(alkaline phosphatase enzyme), 非地高辛标记~
我感觉是不是问题出在转膜和洗膜上。

酶切图片：Southern Blots求助

杂交后的照片：

Southern Blots求助-1

Southern Blots求助-2
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1楼 2016-02-27 12:19:12
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jackyoung

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
物种和上样量？酶切图上所用的Marker多大？探针有没有做点杂？

发自小木虫Android客户端
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CestLaVie
2楼2016-02-27 20:39:30
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fudan671

木虫 (著名写手)
胶的问题感觉

发自小木虫IOS客户端
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3楼2016-02-27 21:38:35
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匿名
本帖仅楼主可见
4楼2016-02-27 21:52:28
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苏xiao苏

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
感觉好像制胶有点问题

发自小木虫IOS客户端
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5楼2016-02-27 22:40:49
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kaka369

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 苏xiao苏 at 2016-02-27 22:40:49
感觉好像制胶有点问题

胶是0.8%的， 我们用的gelred染色，没有用EB。
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6楼2016-02-28 02:47:11
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kaka369

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fudan671 at 2016-02-27 21:38:35
胶的问题感觉

胶是0.8%的， 我们用的gelred染色，没有用EB。
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7楼2016-02-28 02:47:29
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kaka369

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jackyoung at 2016-02-27 20:39:30
物种和上样量？酶切图上所用的Marker多大？探针有没有做点杂？

物种：Ascomycete fungus，基因组大约40M，
Marker：500bp，1kb, 2kb, 3kb, 4kb, 5kb,6kb,8kb,10kb
上样量：4ug
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8楼2016-02-28 02:51:07
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wangxin320

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
感觉4ug上样量太少了吧，我之前做都是50ug，效果很好。
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9楼2016-03-02 17:03:45
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haze12344

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你跑完可以用亚甲蓝染染膜试试
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生物你好
10楼2016-03-03 07:58:33
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