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春丿雷

金虫 (初入文坛)

[求助] GPC分子量测定 已有2人参与

外界环境(温度、湿度等)对GPC检测分子量的PDI影响大吗?GPC检测要注意哪些方面啊?
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zxiaoj678

铜虫 (小有名气)

外界的温度一般会影响柱压,对PDI没影响。等你柱温箱的温度达到自己设定的温度,再测这样好点。。有时候温度的稍有不同,柱压会有稍微的变化,内标和样品的保留时间会稍有差距,如果要纵向比较会有影响,我们一般一个体系会在同一天尽量测完。
根据自己经常的经验,有以下注意的几点:
(1)我们一般用的浓度是3~4mg/ml,用的流动相是THF,苯甲醚是内标(要看你的样品是否溶于你们仪器的流动相。浓度太小噪音大,浓度合适就好,仅仅影响原始数据中的保留体积,我们最终用的都是归一化后的,所以没关系啦~~~~)。
(2)样品尽可能的溶解,记得过滤,注意过滤前观察体系的溶解情况,是溶胀还是分散,还是有浑浊,都要仔细观察。过滤的时候压力大,那就证明你的体系的溶解性不好。(过大不建议测,有堵柱子的可能,除非你老板不在意,大不了换根柱子,哈哈,有钱任性~~~)
(3)剩下的就是自动进样啦~~~~自己设定好序列就OK,进样量自己选择,这也会影响的哦。。。留个悬念,自己想想~~~
处理数据就更简单了,哈哈~~
简单快乐~~
5楼2016-01-28 19:50:48
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feblood

金虫 (正式写手)

feblood

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
春丿雷: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-01-27 09:17:02
不影响PDI。注意样品浓度,百万分子量1mg/mL,要稀点。过滤样品,进样别有气泡。太广泛了这问题

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今夕何夕君已陌路
2楼2016-01-27 07:13:10
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Pureland

木虫之王 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品浓度会影响峰的大小,同样浓度的样品,GPC信号的大小与样品溶液的dn/dc有关,dn/dc越大,样品的GPC信号越强。
4楼2016-01-27 08:54:24
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普通回帖

春丿雷

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by feblood at 2016-01-27 07:13:10
不影响PDI。注意样品浓度,百万分子量1mg/mL,要稀点。过滤样品,进样别有气泡。太广泛了这问题

谢谢,分子量3000样品定的浓度3mg/ml,这个合理吗,样品浓度是不是对峰形有影响?

发自小木虫Android客户端
3楼2016-01-27 08:38:55
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feblood

金虫 (正式写手)

feblood

引用回帖:
3楼: Originally posted by 春丿雷 at 2016-01-27 08:38:55
谢谢,分子量3000样品定的浓度3mg/ml,这个合理吗,样品浓度是不是对峰形有影响?
...

恩。你那低分子量。没问题。

发自小木虫IOS客户端
今夕何夕君已陌路
6楼2016-01-30 08:49:16
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渐入佳境

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by feblood at 2016-01-27 07:13:10
不影响PDI。注意样品浓度,百万分子量1mg/mL,要稀点。过滤样品,进样别有气泡。太广泛了这问题

您好,我想做一下分子量在100万~200万之间的多糖,哪种凝胶色谱柱比较适合呢?
念念不忘,必有回响。所有的相遇都是久别重逢。
7楼2016-04-19 22:14:53
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xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 渐入佳境 at 2016-04-19 22:14:53
您好,我想做一下分子量在100万~200万之间的多糖,哪种凝胶色谱柱比较适合呢?...

具体什么糖?带阳离子么?
提供GPC服务
8楼2016-04-21 09:10:49
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渐入佳境

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2016-04-21 09:10:49
具体什么糖?带阳离子么?...

我这边有两个样,分别是胍胶和魔芋,都没有阳离子

发自小木虫Android客户端
念念不忘,必有回响。所有的相遇都是久别重逢。
9楼2016-04-21 09:22:54
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xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 渐入佳境 at 2016-04-21 09:22:54
我这边有两个样,分别是胍胶和魔芋,都没有阳离子
...

你可以咨询一下东曹和shodex的工程师,他们是专门做色谱柱的,大多数使用水相GPC的单位用的也是这两家的柱子

发自小木虫IOS客户端
提供GPC服务
10楼2016-04-21 09:33:07
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