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分类 共搜索到 411 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
生物科学 PCR体系中六要素的作用
04脱氧核苷三磷酸(dNTPdNTP通常由4种不同的核苷酸组成:dATP、dCTP、dGTP和dTTP,它们分别对应于DNA中的4种碱基(腺嘌呤、胞嘧啶、鸟嘌呤和胸腺嘧啶)。在PCR反应中,这些核苷酸以等摩尔...
科研战神来了 2025-08-22 05:32
生物科学 PCR实验总是出错?别急,可能是这些问题在“搞鬼”
2??dNTP浓度4种dNTP浓度要均?,否则易导致错配,且浓度过低的dNTP会限制DNA合成速度和产量。3??Mg??浓度Mg??浓度过高会降低引物结合严谨性,引发非特异性扩增;浓度过低则会使Taq...
毕合生物2024 2025-07-08 06:25
生物科学 PCR实验小贴士:热盖到底要不要开?
要是不盖热盖,高温会导致反应管内液体蒸发并凝结在管壁或管盖内表面,造成样品体积减少、反应体系失?,以及关键试剂浓度(如引物、模板、dNTP)变化,进而影响扩增效果。而热盖可以防止...
毕合生物2024 2025-06-30 08:28
生物科学 PCR实验问题全攻略,轻松搞定实验难题
4??涂布或弥散条带涂布或弥散条带可能是酶量过多、dNTP浓度过高、MgCl?浓度过高、模板量过多、引物浓度不够优化、循环次数过多、退火温度过低、电泳体系问题或试剂盒质量问题。...
毕合生物2024 2025-06-20 09:14
生物科学 PCR实验:分子生物学的“超级工具”
脱氧核苷酸(dNTPdNTP是DNA的基本组成单元,包括dATP、dGTP、dCTP、dTTP。它们是DNA合成的“原料”,没有它们,DNA就没办法“复制”了。Mg??、K?离子增强剂这些离子能增强DNA聚合酶的...
毕合生物2024 2025-03-26 10:14
虫友互识 晚安
晚安世界
DNTP 2024-12-15 05:14
休闲灌水 喜提半夜推车散步一次
又爆胎了,后胎已经五个洞了(/_\)
DNTP 2024-11-22 04:51
新药研发 干货分享|PCR实验,需要哪些组分/条件,值得收藏!
有时,使用高浓度dNTP也可能也是有益的,特别是在存在高浓度Mg2+的情况下,因为Mg2+可与dNTP结合,减少可被引入的dNTP量。但同时,当dNTP超过最佳浓度时,会抑制PCR反应。为使DNA聚合酶完成...
生物医药实验外 2024-08-29 01:41
分子生物 毛细管电泳等位基因峰高偏离1:1,求前辈指教
样本、引物、缓冲液、dNTP、Polymerse和PCR流程温度时间等条件都验证过,但都没有解决,大量样本的等位基因峰高依然不是1:1,所以请教诸位前辈这可能是什么问题,应该如何解决?
YaVirology 2024-07-28 11:56
休闲灌水 infj每天活在自己的脑海里
早晨在车棚遇到一个在费力往空挡里塞电车的姑娘。“我推走,你停这吧。我说。“要下雨了。她停下来抬起头。“我看了降雨云图,云团在从西往东走,只要我骑的够快雨就追不上我。...
DNTP 2024-07-10 03:39
生物科学 干货分享|PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
dNTP、Mg2+浓度偏高;循环次数过多。对策:纯化模板;对引物进行梯度稀释;更换Buffer;适当提高退火温度;适量用酶;适当降低dNTP和镁离子的浓度;减少循环次数。5.假阳性——空白对照出现...
科研战神·王 2024-05-31 05:29
生物科学 干货分享|PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
dNTP、Mg2+浓度偏高;循环次数过多。对策:纯化模板;对引物进行梯度稀释;更换Buffer;适当提高退火温度;适量用酶;适当降低dNTP和镁离子的浓度;减少循环次数。5.假阳性——空白对照出现...
MDL实验室 2024-05-27 12:58
生物科学 pcr电泳图详细分析
PCR反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即:引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。引物有多种设计方法,由PCR在实验中...
Sh毕合生物 2024-05-22 06:03
生物科学 干货分享|PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
dNTP、Mg2+浓度偏高;循环次数过多。对策:纯化模板;对引物进行梯度稀释;更换Buffer;适当提高退火温度;适量用酶;适当降低dNTP和镁离子的浓度;减少循环次数。5.假阳性——空白对照出现...
超困困狗g 2024-05-16 12:47
生物科学 PCR扩增的步骤
引物的延伸DNA模板-引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性-退火-...
Sh毕合生物 2024-05-14 08:22
医学 5分钟学会如何设计PCR引物
在标准PCR反应体系中,用2UTaqDNA聚合酶和800μmol/LdNTP(四种dNTP各200μmol/L)以质粒(103拷贝)为模板,按95℃,25s;55℃,25s;72℃,1min的循环参数扩增HIV-1gag基因区的条件下,...
科研虫子小助手 2024-05-11 05:17
生物科学 5分钟学会如何设计PCR引物
在标准PCR反应体系中,用2UTaqDNA聚合酶和800μmol/LdNTP(四种dNTP各200μmol/L)以质粒(103拷贝)为模板,按95℃,25s;55℃,25s;72℃,1min的循环参数扩增HIV-1gag基因区的条件下,...
科研战神·王 2024-04-30 02:26
分子生物 干货分享|PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
dNTP、Mg2+浓度偏高;循环次数过多。对策:纯化模板;对引物进行梯度稀释;更换Buffer;适当提高退火温度;适量用酶;适当降低dNTP和镁离子的浓度;减少循环次数。5.假阳性——空白对照出现...
科研实验_研实 2024-04-26 06:53
生物科学 PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
dNTP、Mg2+浓度偏高;循环次数过多。对策:纯化模板;对引物进行梯度稀释;更换Buffer;适当提高退火温度;适量用酶;适当降低dNTP和镁离子的浓度;减少循环次数。5.假阳性——空白对照出现...
基础生物实验外 2024-04-10 12:42
生物科学 PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
dNTP、Mg2+浓度偏高;循环次数过多。对策:纯化模板;对引物进行梯度稀释;更换Buffer;适当提高退火温度;适量用酶;适当降低dNTP和镁离子的浓度;减少循环次数。5.假阳性——空白对照出现...
科研战神·王 2024-03-29 01:33
分子生物 求助各位大佬一个 qPCR 的多重实验问题
请问在做qPCR的多重设计时,各个通道的荧光强度高低不一致改变体系可以调整吗?如果可以请问需要调整哪些参数啊?是dNTP还是Mg2+离子
Lixy9577 2024-03-22 05:48
分子生物 如何设计PCR引物
在标准PCR反应体系中,用2UTaqDNA聚合酶和800μmol/LdNTP(四种dNTP各200μmol/L)以质粒(103拷贝)为模板,按95℃,25s;55℃,25s;72℃,1min的循环参数扩增HIV-1gag基因区的条件下,...
科研战神·王 2024-02-29 01:15
生物科学 干货分享|PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR的区别
3.RT-PCR,指的是逆转录PCR,以由mRNA逆转录成的cDNA为模板,以dNTP为底物,进行DNA的扩增,属于PCR的变种,结果只能定性,不能定量。4.RT-qPCR,指的是实时荧光定量逆转录PCR,是qPCR+RT-...
MDL医学实验 2024-02-21 01:15
微生物 常用PCR技术及原理
1、PCRPCR(PolymeraseChainReaction)即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,体系中加入dNTP、Mg2+以及延伸因子、扩增增强因子,通过变性、...
MDL医学实验 2024-02-19 08:19
生物科学 PCR新手必看:区分各种PCR
01、普通PCRPCR是普通PCR,以双链DNA为模板,以dNTP为底物,特异性地扩增双链DNA。然后采用琼脂糖凝胶电泳对产物进行检测,只能做定性分析。02、实时荧光定量PCRqPCR和Real-timePCR是实时...
科研战神·王 2024-01-22 01:15