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分类 共搜索到 417 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
硕博家园 SSR引物扩增条带弥散/拖尾全原因+分步解决方法
三、PCR体系优化（核心关键）5.Mg?+、dNTP过高→降低扩增严谨性、乱带增多建议梯度试1.5–2.5mMMg?+，dNTP用偏低浓度。6.酶量过多、循环数太多很多人习惯性35–38循环，SSR完全没必要。...
 博友顺 2026-08-05 03:20
分子生物 观察丨人人可及·绿智合成：基因合成本地化时代正在到来
TdT），它是一种不依赖于DNA模板的单链DNA合成酶，能在恒温和金属离子辅助的条件下，催化脱氧核糖核苷三磷酸（dNTP）聚合到寡核苷酸的3'末端，从而合成寡核苷酸链。图片中合基因的酶促DNA...
 中合基因 2026-06-25 07:52
生物科学 ?? 提前配制母液的优势与应用场景
想象一下：如果你每周需要做3次PCR实验，每次都要现配引物、dNTP等试剂，那得浪费多少时间啊！但如果提前配好10×或100×的母液，每次实验只需稀释一下，立刻就能开始反应！4??标准化需求...
 毕合生物2024 2026-05-09 06:47
分子生物 四面体表面合成DNA丨酶促DNA合成应用
Menten）分析了三种支架的酶动力学参数（Km、kcat、kcat/Km），核心结论：Km值（底物亲和力指标）：TDN支架比SS支架低33.64%~43.84%，说明酶对底物（dNTP）的亲和力大幅提升；kcat/Km值...
 中合基因 2026-04-29 09:23
分子生物 酶促法DNA合成详解
TdT酶是一种可在ssDNA3’-OH末端连续添加dNTP的DNA合成酶，属于DNA聚合酶家族X，最早分离于小牛胸腺，并于上世纪八十年代被证实在免疫系统抗体V(D)J重组中发挥作用，随机合成抗体可变序列区...
 中合基因 2026-04-23 01:10
生物科学 PCR扩增≠PCR克隆！一字之差，实验方向大不同
02操作流程不同PCR扩增：流程简单，只需要一步PCR反应，仅需准备模板DNA、引物、Taq酶、dNTP等试剂，放入PCR仪，通过变性-退火-延伸的循环，复制出大量目标DNA片段；产物可直接用于电泳、...
 科研战神来了 2026-04-15 06:40
生物科学 PCR体系中六要素的作用
04脱氧核苷三磷酸（dNTP）dNTP通常由4种不同的核苷酸组成：dATP、dCTP、dGTP和dTTP，它们分别对应于DNA中的4种碱基（腺嘌呤、胞嘧啶、鸟嘌呤和胸腺嘧啶）。在PCR反应中，这些核苷酸以等摩尔...
 科研战神来了 2025-08-22 05:32
生物科学 PCR实验总是出错？别急，可能是这些问题在“搞鬼”
2??dNTP浓度4种dNTP浓度要均?，否则易导致错配，且浓度过低的dNTP会限制DNA合成速度和产量。3??Mg??浓度Mg??浓度过高会降低引物结合严谨性，引发非特异性扩增；浓度过低则会使Taq...
 毕合生物2024 2025-07-08 06:25
生物科学 PCR实验小贴士：热盖到底要不要开？
要是不盖热盖，高温会导致反应管内液体蒸发并凝结在管壁或管盖内表面，造成样品体积减少、反应体系失?，以及关键试剂浓度（如引物、模板、dNTP）变化，进而影响扩增效果。而热盖可以防止...
 毕合生物2024 2025-06-30 08:28
生物科学 PCR实验问题全攻略，轻松搞定实验难题
4??涂布或弥散条带涂布或弥散条带可能是酶量过多、dNTP浓度过高、MgCl?浓度过高、模板量过多、引物浓度不够优化、循环次数过多、退火温度过低、电泳体系问题或试剂盒质量问题。...
 毕合生物2024 2025-06-20 09:14
生物科学 PCR实验：分子生物学的“超级工具”
脱氧核苷酸（dNTP）dNTP是DNA的基本组成单元，包括dATP、dGTP、dCTP、dTTP。它们是DNA合成的“原料”，没有它们，DNA就没办法“复制”了。Mg??、K?离子增强剂这些离子能增强DNA聚合酶的...
 毕合生物2024 2025-03-26 10:14
虫友互识 晚安
晚安世界
 DNTP 2024-12-15 05:14
休闲灌水 喜提半夜推车散步一次
又爆胎了，后胎已经五个洞了(／_＼)
 DNTP 2024-11-22 04:51
新药研发 干货分享|PCR实验，需要哪些组分/条件，值得收藏！
有时，使用高浓度dNTP也可能也是有益的，特别是在存在高浓度Mg2+的情况下，因为Mg2+可与dNTP结合，减少可被引入的dNTP量。但同时，当dNTP超过最佳浓度时，会抑制PCR反应。为使DNA聚合酶完成...
 生物医药实验外 2024-08-29 01:41
分子生物 毛细管电泳等位基因峰高偏离1:1，求前辈指教
样本、引物、缓冲液、dNTP、Polymerse和PCR流程温度时间等条件都验证过，但都没有解决，大量样本的等位基因峰高依然不是1:1，所以请教诸位前辈这可能是什么问题，应该如何解决？
 YaVirology 2024-07-28 11:56
休闲灌水 infj每天活在自己的脑海里
早晨在车棚遇到一个在费力往空挡里塞电车的姑娘。“我推走，你停这吧。我说。“要下雨了。她停下来抬起头。“我看了降雨云图，云团在从西往东走，只要我骑的够快雨就追不上我。...
 DNTP 2024-07-10 03:39
生物科学 干货分享｜PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
dNTP、Mg2+浓度偏高；循环次数过多。对策：纯化模板；对引物进行梯度稀释；更换Buffer；适当提高退火温度；适量用酶；适当降低dNTP和镁离子的浓度；减少循环次数。5.假阳性——空白对照出现...
 科研战神·王 2024-05-31 05:29
生物科学 干货分享｜PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
dNTP、Mg2+浓度偏高；循环次数过多。对策：纯化模板；对引物进行梯度稀释；更换Buffer；适当提高退火温度；适量用酶；适当降低dNTP和镁离子的浓度；减少循环次数。5.假阳性——空白对照出现...
 MDL实验室 2024-05-27 12:58
生物科学 pcr电泳图详细分析
PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即：引物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链）、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）。引物有多种设计方法，由PCR在实验中...
 Sh毕合生物 2024-05-22 06:03
生物科学 干货分享｜PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
dNTP、Mg2+浓度偏高；循环次数过多。对策：纯化模板；对引物进行梯度稀释；更换Buffer；适当提高退火温度；适量用酶；适当降低dNTP和镁离子的浓度；减少循环次数。5.假阳性——空白对照出现...
 超困困狗g 2024-05-16 12:47
生物科学 PCR扩增的步骤
引物的延伸DNA模板-引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链，重复循环变性-退火-...
 Sh毕合生物 2024-05-14 08:22
医学 5分钟学会如何设计PCR引物
在标准PCR反应体系中，用2UTaqDNA聚合酶和800μmol/LdNTP（四种dNTP各200μmol/L）以质粒（103拷贝）为模板，按95℃，25s；55℃，25s；72℃，1min的循环参数扩增HIV-1gag基因区的条件下，...
 科研虫子小助手 2024-05-11 05:17
生物科学 5分钟学会如何设计PCR引物
在标准PCR反应体系中，用2UTaqDNA聚合酶和800μmol/LdNTP（四种dNTP各200μmol/L）以质粒（103拷贝）为模板，按95℃，25s；55℃，25s；72℃，1min的循环参数扩增HIV-1gag基因区的条件下，...
 科研战神·王 2024-04-30 02:26
分子生物 干货分享｜PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
dNTP、Mg2+浓度偏高；循环次数过多。对策：纯化模板；对引物进行梯度稀释；更换Buffer；适当提高退火温度；适量用酶；适当降低dNTP和镁离子的浓度；减少循环次数。5.假阳性——空白对照出现...
 科研实验_研实 2024-04-26 06:53
生物科学 PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
dNTP、Mg2+浓度偏高；循环次数过多。对策：纯化模板；对引物进行梯度稀释；更换Buffer；适当提高退火温度；适量用酶；适当降低dNTP和镁离子的浓度；减少循环次数。5.假阳性——空白对照出现...
 基础生物实验外 2024-04-10 12:42
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