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作者
最后发表
生物科学
基因敲除不成功?可能是忽略了单克隆这一步
4.基因型/表型初筛:从每克隆提取基因组DNA,进行PCR扩增、Sanger测序或T7E1酶切评估突变情况(
indel
率、是否纯合)。5.功能验证:对候选克隆进行蛋白检测(Westernblot、免疫荧光)以及...
我太秀了
2025-10-29 05:53
生物科学
CRISPR敲除细胞系构建指南:实现高效基因编辑的全流程解析
常用检测方法包括:lPCR+Sanger测序:精确鉴定插入/缺失类型(
indel
)lT7E1或Surveyor断裂实验:评估编辑效率与突变比例。源井生物通过结合PCR检测与测序分析的双重验证策略,对基因编辑...
我太秀了
2025-10-21 07:16
生物科学
基因敲除实验优化策略:提升一次成功率
3.多层级验证体系基因组水平:pcr扩增并结合sanger或ngs测序,分析
indel
类型与效率。转录水平:rt-qpcr检测mrna表达量,评估基因沉默效果。蛋白水平:westernblot定量或免疫荧光检测,直观...
我太秀了
2025-08-26 02:11
生物科学
CRISPR技术如何用于基因敲除?一文带你全面了解!
当CRISPR/Cas9在目标位点造成DNA双链断裂(DSB)后,细胞通常通过非同源末端连接(NHEJ)修复此断裂过程,容易引入插入或缺失突变(
Indel
),从而导致编码序列移码或提前终止翻译,实现目标...
我太秀了
2025-08-06 06:17
生物科学
构建 CRISPR 敲除细胞系时要注意哪些步骤
6.筛选与验证基因水平验证:使用PCR扩增靶基因区域,结合Sanger测序或TIDE/ICE分析,判断
INDEL
型及敲除类型(单等位、双等位)。检查片段缺失或拼接区间是否如预期发生。蛋白水平验证:...
我太秀了
2025-06-19 07:56
生物科学
精准点突变细胞系构建:从原理到实操四大策略全解析
indel
风险显著下降在突变功能验证等高精度研究中优势明显潜在限制:pegRNA设计复杂,实验优化周期长整体编辑效率仍有提升空间细胞系依赖性强,部分类型不适配三、BaseEditing:无需断裂的...
我太秀了
2025-05-29 08:28
绿色求助(高悬赏)
Collect.Czech.Chem.Commun.文献一篇
HanaHulinskáa,ZdeněkPolívkaa,Ji?íJíleka,Karel?
indel
á?a,Ji?íHolubeka,EmilSváteka,Olu?eMatou?ováa,Milo?Budě?ínsk?b,HanaFrycová...N-substituted2-(4-methyl-1-...
owen10086
2025-04-25 02:25
文献求助
Collect.Czech.Chem.Commun.文献一篇
HanaHulinskáa,ZdeněkPolívkaa,Ji?íJíleka,Karel?
indel
á?a,Ji?íHolubeka,EmilSváteka,Olu?eMatou?ováa,Milo?Budě?ínsk?b,HanaFrycová...N-substituted2-(4-methyl-1-...
owen10086
2025-04-25 12:37
分子生物
Indel
引物
怎么批量设计
indel
引物,太多了一个一个实在是累了求求过路好心人救救吧
lyltyuhh
2023-06-12 03:25
文献求助
外文期刊求助一篇
Karel?
indel
á?a,Ji?inaMety?ováa,Ji?íHolubeka,EmilSváteka,Ji?íProtivabandMiroslavProtivaaTricyclicpsychotropicagentscontainingtwochalcogenatomsinthecentralring:8-...
myktt
2023-03-14 12:46
生物科学
基因组比较
求助怎么分析基因组比较里的SNP和
Indel
或者有没有相关视频小白实在看不懂急求大佬
籽諾season
2023-01-23 07:09
文献求助
Reaction of 6,11-dihydrodibenzo[b,e]thiepin-11-carbonitrile ...
Karel?
indel
á?a,Milo?Budě?ínskyb,Tomá?VaněkReactionof6,11-dihydrodibenzo[b,e]thiepin-11-carbonitrilewith1,2-dibromoethane,areinvestigation.Formationof11,12-dihydro-6H-...
yi_63
2022-11-25 10:27
文献求助
文献求助
indel
á?Supramolecularhydrogelationviahost-guestanionrecognition:LamellarhydrogelmaterialsforthereleaseofcationiccargoChem20217(9),2473—249010.1016/j.chempr.2021.06.024...
GMJ333
2021-11-11 12:34
分子生物
分子标记
如题,我是做分子标记的,通过比对两个品种的同一个基因后发现有一个碱基的
iNDel
位点缺失,所以请问各路大侠,怎模样设计引物,才能利用这一位点的所设计的引物通过PCR扩增,区分开这两个...
yuanyiwang
2021-09-14 11:43
硕博家园
分子标记
如题,我是做分子标记的,通过比对两个品种的同一个基因后发现有一个碱基的
iNDel
位点缺失,所以请问各路大侠,怎模样设计引物,才能利用这一位点的所设计的引物通过PCR扩增,区分开这两个...
yuanyiwang
2021-09-14 11:27
文献求助
10金币求助Chem文献一篇!
ZoranKokan,MiroslavaDu?ková-Smr?ková,Vladimír?
indel
á?Supramolecularhydrogelationviahost-guestanionrecognition:LamellarhydrogelmaterialsforthereleaseofcationiccargoChem...
baoxp
2021-09-13 01:32
硕博家园
基因组重测序分析
之前测了基因组数据,但是一直不知道怎么分析,有没有小伙伴知道如何进行
indel
,snp分析,或者有没有一些分析的网站和软件
研九省i
2021-08-26 02:05
文献求助
求助 CHem
ZoranKokanMiroslavaDu?ková-Smr?kováVladimír?
indel
á?Supramolecularhydrogelationviahost-guestanionrecognition:LamellarhydrogelmaterialsforthereleaseofcationiccargoChem...
8023SH
2021-07-24 09:22
农林
求问各位大神精细定位中间没有标记可以设计了怎么办
现在的定位区间是70多k,有17个候选基因,只看基因功能注释没办法排除,中间的SNP和
Indel
标记都不能设计引物了,选几个送了KASP但是没缩进距离,接下来应该怎么办啊,求各位大神指点
早日退休
2021-07-19 08:31
微生物
请教关于进化树的一些基础问题
我内心对此做法持怀疑态度,万一不同物种中该基因的确存在
indel
怎么办?删除gaps岂不是忽略这些重要的信息?两个环节的操作,保留所有待比对序列的共有核苷酸位点?2、比如说20个细菌的全...
嘿嘿又呵呵
2021-04-25 02:42
文献求助
求助-
InDel
用于中国人群个体识别的法医学研究
王玮
InDel
用于中国人群个体识别的法医学研究山西医科大学20171-100https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&dbname=CMFD201702&filename=1017848837.nh&v=...
军迷橄榄
2021-03-12 07:27
文献求助
求助-35个
InDel
位点荧光复合扩增检测体系的构建、验证及新疆三个...
解通35个
InDel
位点荧光复合扩增检测体系的构建、验证及新疆三个少数民族遗传背景的探索研究南方医科大学20191-100https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CDFD&...
军迷橄榄
2021-03-11 03:09
文献求助
草鱼MyoD基因SNP和
Indel
标记的筛选及其与生长性状的关联分析
草鱼MyoD基因SNP和
Indel
标记的筛选及其与生长性状的关联分析陈静草鱼MyoD基因SNP和
Indel
标记的筛选及其与生长性状的关联分析江苏农业学报201834(03)
鲜于中书
2021-02-16 07:52
硕博家园
joinmap作图
想请教下可以用joinmap对两对互补基因控制的F2群体作遗传连锁图吗?分子标记为
indel
花草世界
2020-05-07 09:34
文献求助
文献求助,谢谢!
Karel?
indel
á?a,MiroslavRyskaa,Ji?íHolubeka,EmilSváteka,Ji?inaMety?ováa,Ji?íProtivabandMiroslavProtivaaFluorinatedtricyclicneurolepticswithprolongedaction:3-Fluoro-8-...
willson_tian
2020-04-22 09:01
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