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eric201212

铜虫 (小有名气)


[交流] 表达的GST蛋白一直不挂柱,无法纯化

8M尿素过夜溶解包涵体,梯度透析复性(复性液配方:尿素8/6/4/4/0M(即PBS), 50mM TB 8.0, 100mM NaCl, 10mM DTT, 0.5mM GSSG, 5%甘油 ) 每个梯度12h,最后蛋白部分有活性,但是无法纯化(磁珠和树脂柱子都试了)  蛋白不挂柱子。
做了大半年了,希望有经验的各位朋友不吝赐教,谢谢~
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SuYuo

铁虫 (小有名气)



eric201212(金币+1): 谢谢参与
GST标签变性后可能会失去挂柱的能力
10楼2022-11-16 16:04:31
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