查看: 234  |  回复: 8
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 eric201212 的 4 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会

eric201212

铜虫 (小有名气)


[交流] 表达的GST蛋白一直不挂柱,无法纯化

8M尿素过夜溶解包涵体,梯度透析复性(复性液配方:尿素8/6/4/4/0M(即PBS), 50mM TB 8.0, 100mM NaCl, 10mM DTT, 0.5mM GSSG, 5%甘油 ) 每个梯度12h,最后蛋白部分有活性,但是无法纯化(磁珠和树脂柱子都试了)  蛋白不挂柱子。
做了大半年了,希望有经验的各位朋友不吝赐教,谢谢~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lin_7722

铜虫 (小有名气)



eric201212(金币+1): 谢谢参与
重复多次几次挂住操作试试?蛋白实验,我依稀记得老板研讨会讲过,多次挂住操作可以提高回收率。可你这个一直做不出来,有没有可能是之前哪个环节出了问题。下面是一些tips,可以考量一下修改之前实验操作:没有表达; 构建质粒操作设计缺陷; 表达系统选择不合适; 纯化标签没有充分暴露; 纯化工艺需要优化。
祝好~
3楼2022-05-26 16:47:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenhuanlong

至尊木虫 (文坛精英)



eric201212(金币+1): 谢谢参与
4楼2022-05-27 23:37:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1797303268

新虫 (初入文坛)



eric201212(金币+1): 谢谢参与
在蛋白的一段加一个his标签 用NI柱纯化
5楼2022-05-30 21:45:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不要不要321

新虫 (著名写手)



eric201212(金币+1): 谢谢参与
你用的哪种填料,你是gst标签,用的是谷胱甘肽配体的树脂?

发自小木虫Android客户端
6楼2022-06-16 13:20:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谁请我喝奶茶

新虫 (初入文坛)



eric201212(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
5楼: Originally posted by 1797303268 at 2022-05-30 21:45:30
在蛋白的一段加一个his标签 用NI柱纯化

我的是双标签  镍柱挂不上

发自小木虫IOS客户端
7楼2022-06-19 20:47:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谁请我喝奶茶

新虫 (初入文坛)


8楼2022-06-19 20:47:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谁请我喝奶茶

新虫 (初入文坛)


我也在做蛋白纯化 请问你提出来了吗?

发自小木虫IOS客户端
9楼2022-06-19 20:53:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
tzynew2楼
2022-05-18 22:11   回复  
eric201212(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 eric201212 的主题更新
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 今年第4篇sci录用,开心就好 +24 tanzhiheng 2022-06-25 24/1200 2022-06-30 13:20 by Xiaolin81
[基金申请] 国家自然基金青年项目代表作重要吗 +13 佛系Phd 2022-06-30 13/650 2022-06-30 12:47 by gordon399
[教师之家] 一将功成万骨枯 +10 20046073 2022-06-29 10/500 2022-06-30 11:24 by sunlhw
[论文投稿] ACS APPLIED BIO MATERIALS 期刊前景堪忧 +7 烟雨江畔 2022-06-26 9/450 2022-06-30 09:02 by 烟雨江畔
[考研] 材料 +6 庫庫 2022-06-27 6/300 2022-06-30 07:00 by iamt
[论文投稿] 祈福,论文已提交,希望早日分配AE,早日顺利送审 +3 studentshu 2022-06-23 4/200 2022-06-29 23:14 by mingus
[基金申请] 有没有申请2022年全国教育科学规划课题的同志们 +4 pascal1220 2022-06-28 8/400 2022-06-29 21:19 by Lin-Edu
[找工作] 女朋友该不该放弃农村小学教师编制跟我去二本高校人事代理 +38 Zoro秦 2022-06-26 85/4250 2022-06-29 18:20 by feng6531
[访问学者] 2022年CSC访问学者名额大幅度降低的原因是? +9 lydia 2022-06-27 10/500 2022-06-29 14:27 by 鱼儿冒泡泡
[硕博家园] 关于MOFs的名字? +4 winsaint 2022-06-28 7/350 2022-06-29 10:49 by winsaint
[基金申请] 青基啥时候会评?:cry: +5 南大一葱 2022-06-28 9/450 2022-06-29 09:13 by 王赵钱孙李
[论文投稿] 被编辑拒稿后要求重投应该如何处理? +3 Wiatr 2022-06-27 11/550 2022-06-28 19:13 by Wiatr
[论文投稿] with journal administrator是什么意思 +3 914450032 2022-06-27 11/550 2022-06-28 18:15 by 914450032
[考博] 考博求助 +4 710960530 2022-06-28 11/550 2022-06-28 15:54 by xysxm
[有机交流] 重结晶 +9 化学学习友 2022-06-24 18/900 2022-06-28 12:50 by 化学学习友
[论文投稿] 投稿EI期刊不确定性很大了吗 +5 ipfm1468 2022-06-27 9/450 2022-06-27 23:26 by jiajiang1
[论文投稿] 有人投过武汉大学学报(工学版)吗? +3 zijunjun 2022-06-27 6/300 2022-06-27 18:27 by zijunjun
[基金申请] 博士后特别资助(站中)这周没戏了 +7 zhao129 2022-06-24 8/400 2022-06-26 20:13 by 顽皮博士
[硕博家园] origin2019b老是bug +9 Aries-FZU 2022-06-23 14/700 2022-06-24 19:54 by Special-Xp
[基金申请] 博后基金评分 +8 ZHLGL1 2022-06-23 14/700 2022-06-24 17:34 by 3115321
信息提示
请填处理意见