| 查看: 3375 | 回复: 9 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者周霸霸霸将赠送您 5 个金币 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
质粒大提加入异丙醇没有沉淀已有1人参与
|
||
|
今天用QIAGEN 的MEGA 试剂盒做了大提，在洗脱液加入异丙醇后可以见到有玻璃状的东西漂浮，然后我在4度冰箱里放置了大概两个多小时后再12000rpm ，30min，4度 离心后管壁什么都没有，我把液体倒出来看也没看到有沉淀，之后用70%乙醇洗涤同样条件离心后发现也什么都没有，想请问问题到底出在哪里呢？查了资料也看到说是因为我的异丙醇和我的洗脱液没有混匀，但也不可能一点沉淀也没有吧，这个是否和离心管也有关？我用的高速离心用的圆底的厚壁离心管，加上异丙醇沉淀的质粒DNA 本身就是吸附不牢靠所以被倒出来了，不过我在我倒出来的液体里也真没看到任何沉淀物，或者是我洗脱的质粒DNA 量本来就不够？！这个试剂盒的过柱太麻烦了，做了一天没有东西希望大家提点意见！卑微.jpg 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
球磨纳米粒子条件
已经有6人回复
-
球磨分散剂
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有231人回复
-
阴阳离子交换剂！！！！
已经有3人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酸接酚羟基，
已经有11人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酰氯
已经有10人回复
-
酸酐或者羧酸酰氯化
已经有15人回复
-
酚羟基接入磷酸，磷酸酯化
已经有26人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2019-09-27 22:44:02
|
菌我觉得有问题当时小摇后换大摇是500ml LB 加到500ml锥形瓶里，离心后菌液沉淀大概1.6g/L ，颜色也是灰棕色的那种，之前用这个菌中提产量还是可以的。 试剂盒……过期了的，不过我用P 1，P2，P3感觉是有用的，我怀疑是洗脱DNA 那里的buffer 有问题 发自小木虫IOS客户端 |
5楼2019-09-28 09:21:34
6楼2019-09-28 09:23:50
9楼2019-09-29 10:41:18
5