| 查看: 4267 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
质粒大提加入异丙醇没有沉淀 已有1人参与
|
|||
|
今天用QIAGEN 的MEGA 试剂盒做了大提，在洗脱液加入异丙醇后可以见到有玻璃状的东西漂浮，然后我在4度冰箱里放置了大概两个多小时后再12000rpm ，30min，4度 离心后管壁什么都没有，我把液体倒出来看也没看到有沉淀，之后用70%乙醇洗涤同样条件离心后发现也什么都没有，想请问问题到底出在哪里呢？查了资料也看到说是因为我的异丙醇和我的洗脱液没有混匀，但也不可能一点沉淀也没有吧，这个是否和离心管也有关？我用的高速离心用的圆底的厚壁离心管，加上异丙醇沉淀的质粒DNA 本身就是吸附不牢靠所以被倒出来了，不过我在我倒出来的液体里也真没看到任何沉淀物，或者是我洗脱的质粒DNA 量本来就不够？！这个试剂盒的过柱太麻烦了，做了一天没有东西希望大家提点意见！卑微.jpg 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有112人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-09-28 22:47:12
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-09-28 22:47:12
|
你的菌没问题吧，用试剂盒一般都没什么问题啊，小提能提出来不，要不换个试剂盒试试？ 发自小木虫Android客户端 |
3楼2019-09-28 04:36:59
2楼2019-09-27 22:44:02
huimukao
无虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: -144.8
- 散金: 1500
- 帖子: 218
- 在线: 74.5小时
- 虫号: 14734216
- 注册: 2019-03-26
- 专业: 有机合成
4楼2019-09-28 09:11:14
|
菌我觉得有问题当时小摇后换大摇是500ml LB 加到500ml锥形瓶里，离心后菌液沉淀大概1.6g/L ，颜色也是灰棕色的那种，之前用这个菌中提产量还是可以的。 试剂盒……过期了的，不过我用P 1，P2，P3感觉是有用的，我怀疑是洗脱DNA 那里的buffer 有问题 发自小木虫IOS客户端 |
5楼2019-09-28 09:21:34
20