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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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fast-rui

新虫 (小有名气)

[交流] 异源表达蛋白遇到问题已有8人参与

本人最近在做异源表达,用的pet28a表达载体,宿主菌是BL21,od摇到0.6-0.8,16℃诱导19h,做了几次蛋白大部分都在包涵体中,iptg浓度试过0.1-0.8mM的。这次打算试试培养基多调几个ph试试。
但是想问就是我的蛋白等电点是6.74,LB的ph会影响表达吗?破碎的时候蛋白裂解液的ph设为多少比较合适?有没有大神可以给我点建议,看看能不能把包涵体减少。

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张凡云

至尊木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
两个方案,用pGEX4T-1这样的融合表达系统,二是用rosetta这样的宿主菌

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8楼2019-06-12 09:20:44
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