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[求助]
overlap PCR已有2人参与
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| 有一个大约10kb的片段，分成两段，用PCR扩增出来了，且两片段之间有25BP的同源臂，现在用overlap PCR一直扩不出目的片段，出现了非特异型扩增，primer用的还是原来的，一个片段的上游引物，一个片段的下游引物，延伸时间增加了一倍，但一直做不出来，各位有为有好一点的建议？ |
球磨纳米粒子条件
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